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目的:建立嗜中性粒细胞哮喘和嗜酸性粒细胞哮喘小鼠模型,研究Il-25对巨噬细胞M1极化、Il-12、Il-23表达以及嗜中性粒细胞哮喘模型气道炎症的影响。方法:6到8周龄的雌性C57BL、6J小鼠,分为4组（n=6-8）,分别是嗜中性粒细胞哮喘组（OVA/LPS组）、嗜酸性粒细胞哮喘组（OVA组）、嗜中性粒细胞哮喘+Il-25组（OVA/LPS/Il-25组）和对照组。小鼠肺功能检测不同组小鼠气道高反应性,小鼠肺组织HE染色显示各个气道周围炎症细胞浸润情况,进行炎症程度评分（0-4分）。进行小鼠BALF细胞总数及炎性细胞分类计数。RT-PCR检测不同组小鼠肺组织中Il-12、Il-23、Il-25、巨噬细胞极化标记以及Il-1β、Ifn-γ的m RNA表达水平,流式细胞术检测巨噬细胞M1和M2极化情况。小鼠BALF甩片行免疫荧光染色检测Il-12b、Cd80阳性细胞。结果:与对照组相比,嗜酸性粒细胞哮喘组和气道反应性增加。小鼠肺组织HE染色和BALF炎性细胞计数结果显示,嗜中性粒细胞哮喘组小鼠气道发生明显的炎症细胞浸润。外源性Il-25显著抑制了嗜中性粒细胞哮喘小鼠模型的气道炎症浸润和BALF嗜中性粒细胞计数。RT-PCR结果显示嗜中性粒细胞哮喘组小鼠肺组织中M1型巨噬细胞标记物（Cd80、inos、Tnfα）和效应分子Il-12、Il-23、Il-1β、Ifn-γ的m RNA表达显著增加,而外源性Il-25显著抑制M1型标记物和效应分子的表达。流式细胞术结果显示小鼠肺组织和肺泡灌洗液中巨噬细胞发生明显的M1极化,免疫荧光结果显示嗜中性粒细胞哮喘组小鼠肺泡灌洗液中Il-12b和Cd80阳性染色细胞数量明显增多。与嗜中性粒细胞哮喘组相比,外源性Il-25滴鼻后嗜中性粒细胞哮喘小鼠模型中巨噬细胞M1极化以及Il-12、Il-23的表达均受到抑制。结论:在嗜中性粒细胞哮喘小鼠模型中,气道存在明显的嗜中性粒细胞浸润,肺部M1巨噬细胞数量增加,M1巨噬细胞效应分子Il-12、Il-23表达增加。外源性Il-25明显减轻嗜中性粒细胞哮喘小鼠的气道炎症。并且外源性IL-25抑制巨噬细胞M1极化以及Il-12、Il-23的表达。目的:观察Il-25是否抑制体外培养的巨噬细胞M1极化和Il-12、Il-23表达。探讨Il-25是否通过STAT3通路抑制LPS诱导的NF-κB核转位,从而阻断巨噬细胞M1极化以及Il-12、Il-23表达。方法:提取小鼠原代肺部巨噬细胞,分为4组:对照组、Il-25组、LPS组和Il25+LPS组,指定时间点收集细胞。RT-PCR检测Il-12、Il-23的m RNA表达水平;Western Blot法检测Il-12、Il-23的蛋白水平和STAT3的磷酸化水平;提取胞浆胞核蛋白后经Western Blot法检测NF-κB的胞浆胞核表达情况以评估NF-κB核转位情况;免疫荧光检测巨噬细胞中NF-κB核转位。在LPS、Il-25干预之前用p STAT3有效抑制剂（Stattic）预处理小鼠肺部巨噬细胞1小时,观察LPS及Il-25对NF-κB核转位及Il-12、Il-23表达的影响。结果:LPS刺激小鼠肺部巨噬细胞后NF-κB核转位明显增强,巨噬细胞M1标记（Cd80）及效应细胞因子（Il-1β）表达增加,Il-12、Il-23的表达增强。与LPS组相比,Il-25处理小鼠肺部巨噬细胞后STAT3磷酸化增强,NF-κB核转位受到抑制,巨噬细胞M1标记表达下降,Il-12、Il-23的表达受到抑制。Western Blot和免疫荧光结果显示Stattic预处理肺部巨噬细胞后Il-25对NF-κB核转位和Il-12、Il-23的抑制作用明显减弱。结论:LPS通过诱导NF-κB家族成员c-Rel核转位,促进巨噬细胞M1极化和Il-12、Il-23表达。外源性IL-25通过激活STAT3信号通路,抑制LPS诱导的NF-κB家族成员c-Rel核转位,从而阻断巨噬细胞M1极化和Il-12、Il-23的表达。目的:收集对照组、嗜酸性粒细胞哮喘组、非嗜酸性粒细胞哮喘组气道刷片、诱导痰和BALF细胞,检测IL-12、IL-23与IL-25的表达,对动物实验和细胞实验中的发现进行验证。方法:收集对照组（n=10）、嗜酸性粒细胞哮喘组（n=20）、非嗜酸性粒细胞哮喘组（n=14）气道刷片标本,RT-PCR检测IL-25以及IL-12、IL-23 m RNA水平,并进行IL-25与IL-12、IL-23的相关性分析。收集嗜酸性粒细胞哮喘组（n=17）、非嗜酸性粒细胞哮喘组（n=12）诱导痰,RT-PCR检测其中IL-25以及IL-12、IL-23 m RNA水平,M1型巨噬细胞标志物（CD80、i NOS）和效应分子（IL-1β、IFN-γ）m RNA表达水平;免疫荧光检测BALF甩片中CD80和IL-12B的阳性细胞。结果:嗜酸性粒细胞哮喘组气道上皮细胞中IL-25 m RNA水平显著增高,而非嗜酸性粒细胞哮喘组IL-12、IL-23 m RNA水平明显增高,气道上皮细胞IL-25与IL-12、IL-23的m RNA水平之间存在负相关。与此一致,嗜酸性粒细胞哮喘组诱导痰细胞中IL-25的m RNA水平较非嗜酸性粒细胞哮喘组显著增高,而非嗜酸性粒细胞哮喘组IL-12、IL-23表达较嗜酸性粒细胞哮喘组明显增高。同时,非嗜酸性粒细胞哮喘组诱导痰细胞中M1型巨噬细胞标记（i NOS）以及M1型巨噬细胞效应分子IL-1β、IFN-γ表达升高。BALF甩片免疫荧光结果发现,非嗜酸性粒细胞哮喘患者诱导痰细胞中CD80阳性细胞以及IL-12B阳性细胞的数量增加,而且两者表达于同一个细胞。结论:与嗜酸性粒细胞哮喘患者相比,非嗜酸性粒细胞哮喘患者的气道刷片、诱导痰细胞和BALF细胞中IL-12、IL-23表达增高,M1巨噬细胞标记物CD80,i NOS表达增加。这提示巨噬细胞M1极化和IL-12、IL-23表达上调可能参与非嗜酸性粒细胞哮喘的发病。