香石竹的离体培养与试管开花研究

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利用组织培养的方法,研究香石竹(Dianthus caryophyllus L.)的离体培养、试管开花以及花芽诱导过程中其内部生理生化的变化,建立香石竹的快速繁殖体系,缩短营养生长向生殖生长转化的时间,探讨其花芽分化规律在理论上和应用上都具有重要的意义。本文研究了不同浓度的6-BA、NAA,不同的琼脂浓度以及不同的封口材料对香石竹叶片和带有腋芽的茎段诱导的影响。研究发现,6-BA和NAA对香石竹叶片和腋芽的诱导率具有显著性差异。6-BA和NAA不同浓度的配比组合对叶片和腋芽诱导的影响也有很大程度的差别,当6-BA和NAA浓度分别为2.0mg.L-1和0.5mg.L-1的组合时,芽的诱导率最高达到11.2%和87.9%。培养基中不同的琼脂浓度对芽的诱导率形成显著性影响,当琼脂浓度为7g.L-1时,芽的长势最好且发育出许多叶子。不同的封口材料对香石竹叶片和腋芽诱导效果显著,使用透气封口膜芽生长速度快,利于植株枝条和叶片的旺盛生长和形成。通过筛选,香石竹的腋芽在不同条件下的发芽率均要比叶片的发芽率高。本文重点研究了生根、愈伤组织、N/P含量、蔗糖浓度、6-BA,NAA等对香石竹组培苗花芽发生和花发育的影响。研究发现,根对花芽形成有显著影响,生根明显抑制花芽诱导。是否分化愈伤组织对香石竹花芽诱导的影响不大。调整了MS培养基中的氮和磷含量,明显提高了花芽的诱导率,其中1N和5P的配比下花芽诱导率最高。在一定范围内培养基中蔗糖含量与花芽诱导率成正相关,但是过高的含量会产生玻璃化苗。6-BA(0.5mg.L-1)和NAA(0.1mg.L-1)配比时,花芽诱导率最高,达到72.3%。通过筛选,诱导香石竹花芽形成效果最好的培养方法是:在改良的MS基本培养基(1倍氮,5倍磷),蔗糖浓度提高到35g.L-1,并加入适宜浓度的6-BA(0.5mg.L-1)和NAA(0.1mg.L-1)可诱导香石竹试管苗在60天内开花。2个月内统计花芽诱导率为70%左右。以诱导花芽形成效果最佳的最佳培养基作为处理组,同时设一对照组:MS,附加蔗糖30 g.L-1,琼脂浓度6.5g.L-1,pH5.8。研究香石竹花芽诱导过程中植株内部生理生化的变化和相关性。花芽诱导率高的处理,其可溶性蛋白质、可溶性糖、内源激素含量在整体上都明显高于花芽诱导率低的处理。
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