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环境内分泌扰乱化学物(Endocrine disrupting chemicals,EDCs)亦称内分泌干扰物(Endocrine dismptom)、环境激素(Environmental hormones),是指干扰生物体内维持自稳性及调节发育过程中荷尔蒙的产生、释放、代谢、结合、排泄、交互作用的外源性物质,它们表现出拟天然激素或抗天然激素的作用。本文以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum Adams et Reeve,又称蛤仔,隶属瓣鳃纲、真瓣鳃目、帘蛤科)为模型动物,选择对软体动物影响较大而且依然存在于环境中的EDCs——三丁基氧化锡(Bis[tri-n-butyltin]oxide,TBTO,C24H54OSn2)作为诱导物,研究了菲律宾蛤仔对三丁基氧化锡的富集系数及富集方式,并辅以消化盲囊、鳃、外套膜的超微结构变化以及解毒器官消化盲囊的酶组织化学变化,探讨了三丁基氧化锡对菲律宾蛤仔的毒性影响及内分泌干扰效应。 为研究菲律宾蛤仔对三丁基氧化锡的富集作用,本文采用单一浓度200ng/L,不同作用时间的方式,进行了为期四—五周的实验。每周取样一次,采用气相色谱-离子俘获检测器联用方法(GC-ECD)测定三丁基锡生物富集量(方法检测限:20ng/ml,回归曲线:Y=0.7062X+12.949,线性范围:以C24H54OSn2计100ng/g—1000ng/g)。实验结果表明,经一周TBTO暴露,蛤仔生物富集系数最低达300以上。不同组织的TBTO检测中,消化盲囊富集系数远高于其它组织(BCF>3000)。随三丁基锡暴露时间的延长,各组织富集系数均呈上升趋势。统计检验显示,各组之间差异显著(p<0.05),说明蛤仔对TBTO的富集能力很强,同时具有组织间的差别。 TBTO对蛤仔各组织超微结构的破坏随时问延长而加剧。(1)消化盲囊的主要表现为:暴露一周后,嗜碱性细胞及消化细胞核膜轻度水肿,内质网多出现水肿膨胀。暴露第二周,细胞部分线粒体嵴溶解,微绒毛外膜有轻微扭曲。细胞基底层出现局部空缺,基底层与细胞之间出现网状结构。细胞连接处出现缝隙。暴露三周及第四周后,细胞内质网大量溶解,呈现空泡化。长期暴露于低浓度TBTO的蛤仔消化盲囊细胞中最敏感的细胞器是内质网,其次为线粒体。(2)经200ng/L TBTO暴露一至两周后,鳃上皮细胞的局部核膜轻微溶解,部分细胞内质网水肿,个别核的染色质凝聚成颗粒状。暴露三周及第四周后,胞质大面积溶解,核膜不完整,微绒毛有轻微水肿,部分内质网形成空泡,线粒体部分溶解。(3)外套膜各细胞器的变化与鳃类似。 TBTO对蛤仔消化盲囊酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及细胞色素氧化酶的影响主要为随接触时间的增加酶活性明显降低,表现为随时间延长组织各部位着色变浅。但基本活性部位没有改变,未发现局部病灶性异常。