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目的:将壳聚糖纳米复合物修饰到玻碳电极上,以磺胺甲噁唑抗体为探针,抗生素磺胺甲噁唑作为检测对象,探讨一种新型的电化学免疫传感器。 方法:合成了氧化铈(CeO2)纳米和羟基磷灰石(HA)纳米,按照不同比例分别与壳聚糖(CHIT)溶液混合,制得CHIT-纳米复合物,作为电极修饰材料。采用滴涂法,室温下干燥24h,制得CeO2-CHIT修饰玻碳电极和HA-CHTT修饰玻碳电极。用电化学方法对两种修饰电极的性能进行表征,发现两种纳米复合物修饰电极的电流响应信号均有明显增加。在化学修饰电极上固定磺胺甲噁唑(SMX)抗体作为探针,依据免疫竞争法,样品磺胺甲噁唑与辣根过氧化物酶标记磺胺甲噁唑竞争电极上的抗磺胺甲噁唑多克隆抗体,采用差分脉冲伏安法检测,SMX浓度与辣根过氧化物酶催化底物产生的电流成负相关。对实验条件如抗原抗体的反应时间,检测底液的pH值等进行了优化。 结果:免疫反应时间20min,孵育温度37℃,检测底液的pH为5.5时,电流响应最灵敏。在最优的实验条件下,峰电流的差值与SMX的浓度有良好的线性关系。CeO2-CHIT修饰的玻碳电极,线性范围为5.0×10-7-5.0×10-4 mg/mL,线性方程为△I=5058.9 c+0.3174,相关系数为0.9953,最低检出限为3.25×10-7mg/mL;HA-CHIT修饰的玻碳电极,线性范围为1.0×10-7-5.0×10-4mg/mL,线性方程为△I=9695.2 c+0.6511,相关系数为0.9909,最低检出限为8.54×10-8mg/mL。对抗磺胺甲噁唑多克隆抗体的特异性检验发现抗磺胺甲噁唑的多克隆抗体特异性良好,对实验的其它5种磺胺类药物的交叉反应率均小于1%。用该免疫传感器对市售脱脂牛奶、鸡蛋和蜂蜜进行了测定,加标回收率在95.4-100.8%之间。两种实验方法的相对标准偏差均小于5%,表明重复性良好,对实际样品的检测结果令人满意。 结论:CeO2-CHIT和HA-CHIT的纳米复合物均能够为抗体探针的固定提供较好的微环境,提高电极表面电子的传递。因此,它们都能够作为制作新型的免疫传感器的材料,实现对抗原物质的检测。