萎缩芽孢杆菌297抑菌物对群体感应信号分子DKPs致腐能力的抑制作用

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群体感应(quorum sensing,QS)是细菌的数量到达一定密度后利用自身分泌的信号分子进行信息交流的现象,并且群体感应参与了食品腐败变质过程的调控。前期研究表明,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、志贺氏菌、单增李斯特菌均可以分泌二酮哌嗪类(Cyclic dipeptides Diketopiperazines,DKPs)信号分子。鉴于此,本研究以腐败菌的生长、黏附能力、生物被膜形成能力、蛋白酶活性、泳动能力及胞外多糖含量为腐败指标,研究了外源信号DKPs对腐败菌腐败性的影响以及萎缩芽孢杆菌297抑菌物(CP 297-CFE)对群体感应信号分子DKPs致腐能力的作用。最终将5株腐败菌的混合菌悬液、信号分子DKPs及萎缩芽孢杆菌297抑菌物(CP 297-AE)同时喷施在橘子上,通过对橘子微生物指标及理化指标的测定,确定CP 297-AE对信号分子DKPs引起橘子腐败变化的影响。研究得到的结果如下:通过分析添加信号分子DKPs及芽孢菌抑菌物培养后腐败菌的腐败能力,发现添加外源信号分子对5种腐败菌生长均有促进作用,与同时添加信号分子CP 297-CFE相比,CP 297-CFE的添加抑制了信号分子DKPs对腐败菌生长的促进作用。相对于添加了信号分子的腐败菌,同时添加DKPs及CP 297-CFE培养的腐败菌生物被膜形成较慢,如:大肠杆菌培养在36h时,同时添加信号分子及CP 297-CFE培养的生物被膜量仅为添加信号分子培养的74%。相对于添加了信号分子的腐败菌,同时添加DKPs及CP 297-CFE培养的腐败菌黏附能力明显减弱,如将志贺氏菌培养到第48h时喷施了信号分子与同时喷施信号分子及CP 297-CFE在试管壁上的粘附量分别为8.62CFU和7.48CFU。相对于添加了信号分子的腐败菌,同时添加DKPs及CP 297-CFE培养的腐败菌蛋白酶活明显减弱。相对于添加了信号分子的腐败菌,同时添加DKPs及CP 297-CFE培养的腐败菌泳动能力明显减弱,如将志贺氏菌培养到第36h时喷施了信号分子与同时喷施信号分子及CP 297-CFE志贺氏菌的扩散半径为(90±0.1)mm和(43.6±0.1)mm。相对于添加了信号分子的腐败菌,同时添加DKPs及CP 297-CFE培养的腐败菌胞外多糖含量明显减少。结果表明,CP 297-CFE的添加使DKPs对腐败菌生长、黏附能力、生物被膜形成能力、蛋白酶活性、泳动能力及胞外多糖含量的促进作用明显降低。将腐败菌菌悬液、信号分子及CP 297-CFE应用在橘子上,通过对橘子微生物指标及理化指标的测定,研究CP 297-CFE对信号分子DKPs引起橘子腐败变化的影响。研究表明,与喷施了无菌水保存的橘子相比,在橘子上喷施了腐败菌可使橘子加速腐败;与喷施腐败菌贮藏的橘子相比,同时喷施腐败菌及信号分子贮藏的橘子腐败程度加快,说明信号分子可使食品群体感应的腐败菌加速增长,使其腐败能力增强,加速食品腐败。而在喷施了CP 297-CFE后,信号分子对食品的腐败的促进作用明显降低,所以CP297-CFE对信号分子DKPs引起橘子的腐败有明显的抑制作用。综上所述,外源信号分子DKPs对腐败菌腐败能力有明显的促进作用,而芽孢菌抑菌物对信号分子DKPs致腐能力有明显的抑制作用。
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