降解烟碱微生物的筛选及在烟秆腐熟发酵中的应用

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通过高温堆肥技术,将废弃烟秆转化为生物有机肥,是减少烟秆丢弃或焚烧造成环境污染和土传病害传播的有效手段。本研究筛选得到一株烟碱降解菌,优化其培养基和培养条件,应用到烟秆堆肥中,降低堆肥中烟碱含量和促进堆肥腐熟,为烟秆堆肥应用和生产发挥一定作用。本研究从土样、烟秆、实验室已保藏菌株中筛选到共81株可降解烟碱微生物。进一步筛选得到一株降解烟碱能力最好的菌株EA-17,经过形态观察、生理生化试验、16S rDNA序列分析得到EA-17菌株疑似嗜组氨醇节杆菌(Arthrobacter histidinolovorans)。通过培养条件和培养基优化试验,得到适宜EA-17菌株生长的培养基及培养条件,即K2HPO4 13.3 g/L, KH2PO4 4 g/L,烟碱1.5 g/L,葡萄糖10 g/L,蛋白胨12 g/L,玉米浆干粉8 g/L,硫酸铵12.5 g/L,MgSO4 0.2 g/L, FeSO4 0.22 g/L。发酵条件为30℃,pH6.5 (自然pH),种龄10 h,接种量为2%。在该培养基和培养条件下,EA-17菌株烟碱脱氢酶酶活达到8.11U/ml,是LB培养基中的2.92倍,也远高于同属其他菌株。在初始烟碱含量为0.5-4 g/L的发酵液中培养EA-17菌株24 h,初始烟碱含量为0.5g/L和1g/L的发酵液烟碱降解率分别为81.62%和71.36%,初始烟碱含量为2g/L和4g/L的发酵液烟碱降解率更是达到了96.16%和95.63%。以烟秆和废水污泥为混合原料(1:1)做堆肥试验,添加EA-17菌株的混合菌剂(T)处理和未添加EA-17菌株的混合菌剂(CK)处理烟碱降解率分别为49.33%和28.27%。T处理较CK处理,高温时间延长了7天。T处理有机质降解率达到了33.49%,提高了15.76%。纤维素和半纤维素降解率也提高了26.29%和17.52%。总N、K含量也得到了提高,分别提高了8.05%和6.62%。
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