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本研究应用基因工程、细胞培养、蛋白质印迹法、酶联免疫测定等技术,构建硫氧还蛋白(TRX)与生长抑素(SS)融合表达质粒pVAX1-TRX-SS并探讨其在猪上的应用效果。按SS的基因设计引物,以pET32a(+)中的TRX标记基因为模板,扩增获得SS-TRX融合基因,并将该段基因插入pVAX1质粒载体中,构建成pVAX1-TRX-SS真核表达质粒,酶切和测序鉴定表明质粒构建正确。用Lipofectamine~?2000 Reagent将上述质粒转染CHO细胞进行瞬时表达,24小时后提取细胞总蛋白,western blot可以检测到SS14。为进一步研究该核酸疫苗的作用,分别设计了生长期猪和妊娠母猪试验。选取60日龄去势公猪18头,随机分为三组,分别半膜肌注射0毫克(生理盐水),1毫克和2毫克pVAX1-TRX-SS质粒,对照组为Ⅰ组,1毫克和2毫克组分别为Ⅱ和Ⅲ组,注射后用活体基因导入仪电击处理。结果显示,试验期第45天,Ⅱ组和Ⅲ组平均日增重分别比Ⅰ组提高13.9%(P<0.05)和11.4%(P>0.05),料重比都降低了6.2%(P>0.05)。免疫后2周,Ⅱ组血清中SS含量显著低于Ⅰ组;Ⅲ组血清中SS含量则在免疫后第4周显著低于Ⅰ组。Ⅱ组生长抑素抗体(SS-Ab)阳性率在免疫后第4周达到峰值80%,Ⅲ组则在免疫后第4周达到80%并维持到6周。选择30头胎次相近、生理状况相似的母猪,随机分为3组,在妊娠第75天时分别用活体基因导入仪注射2毫克pVAX1空载体、2毫克pVAX1-TRX-SS和4毫克pVAX1-TRX-SS。结果表明,2毫克质粒组试验母猪后代初生重比对照组提高9.70%,4毫克组比对照组高14.18%,差异都达到极显著水平(P<0.01);4毫克质粒组的试验母猪后代断奶重分别比对照组和2毫克质粒组提高8.16%和4.13%,差异极显著(P<0.01);4毫克质粒组试验母猪在免疫后40天血清中SS-Ab的P/N极显著高于2毫克质粒组(P<0.01),同时显著高于对照组(P<0.05),阳性率达到60%;4毫克质粒组试验母猪血清催乳素(PRL)浓度比对照组高120.23%(P<0.05),两试验组母猪血清中胰岛素样生长因子1(IGF-1)有比对照组升高趋势,其中4毫克组比对照组高18.54%,但差异不显著(P>0.05),试验母猪后代血清中的IGF-1未见显著差异(P>0.05);4毫克质粒组试验母猪血清IGFBP-3显著高于对照组和2毫克质粒组(P<0.05);试验组母猪间及其后代间的各项血清生化指标都没有显著差异(P>0.05)。本试验成功构建pVAX1-TRX-SS质粒,该质粒能在猪体内引发免疫反应并产生SS抗体,对生长猪的生长以及妊娠母猪的生产有促进作用。