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钙离子激活的氯离子通道(calcium-activated chloride channels，CaCCs)在许多生理学过程中都扮演着重要的作用。但是直到最近，其分子基础即跨膜蛋白TMEM16A(Transmembrane protein 16A，TMEM16A)才被三个研究小组用不同的策略发现并证实。至此以后，对此基因的研究又向两个方向延伸:一方面深入研究TMEM16A的组织表达定位、分子结构与疾病的关系等，另一方面，由于TMEM16A属于TMEM16这个基因家族的一员，且据报道此家族的其他成员也与离子通道功能有关系，于是也有研究人员研究TMEM16基因家族其他成员的组织表达定位，并推测其生理功能。 跨膜蛋白16A最近被认为是钙离子激活的氯离子通道蛋白的分子基础，表达于许多细胞和组织中，并在许多癌症中过表达，但其功能尚不清楚。为深入研究人TMEM16A(human TMEM16A，hTMEM16A)蛋白的结构与功能。本文从人结肠癌细胞SW620中提取总RNA，逆转录合成cDNA，采用PCR扩增了hTMEM16A近C端特异性肽段的编码序列（hTMEM16A-specific peptide coding sequence，hTMEM16A-sp）连接至表达载体pGEX-2T中，构建了重组表达质粒，酶切、测序鉴定获得重组质粒。将重组质粒在大肠杆菌BL-21中进行高效表达，用IPTG诱导获得了可溶性重组蛋白，采用GST亲和层析和凝胶过滤层析的方法对重组蛋白进行了纯化，获得纯度为90％以上、浓度为7 mg/L的融合蛋白，利用SDS-PAGE及Western blotting证实目的蛋白为含有GST的融合蛋白。采用纯化后的含有GST的融合蛋白免疫日本长耳大白兔制备多克隆抗体，ELISA法测定血清抗体的效价高达1∶100000。通过细胞免疫荧光实验在SW620细胞中对该蛋白的表达位置进行定位，同时构建pcDNA3.1/hTMEM16A真核表达质粒，为深入研究人TMEM16A蛋白的结构与功能奠定了基础。