植物乳杆菌LPC718产细菌素发酵条件的研究

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植物乳杆菌素具有安全、无毒、高效以及不易产生病原菌抗性等优点,被广泛应用于食品、医药和饲料工业中。研究表明,植物乳杆菌素LPC718在酸性条件下活性稳定;热稳定性好;抑菌范围较广,具有一定的研究价值。为了提高植物乳杆菌素的产量,本研究利用生物学软件设计实验,对产植物乳杆菌素LPC718的发酵条件进行了优化研究。植物乳杆菌LPC718的生长与细菌素产量之间呈现正相关。菌株LPC718培养4-6h后即进入对数期,28-32h左右进入稳定期;发酵4h后pH值显著下降,发酵30h后pH值达到3.7左右并趋于稳定。菌株LPC718的细菌素合成曲线与细胞生长情况曲线基本一致,4h后可检测到细菌素的产生,28h进入稳定期后产量保持平稳,稳定期后期细菌素产量开始减少。研究了温度、培养基初始pH值、接种量、种龄和培养方式对植物乳杆菌素产量的影响。结果表明,植物乳杆菌LPC718发酵的最优环境条件为:种龄为14h的种子液、静置培养、4%接种量、发酵培养基初始pH值为7.5、发酵温度为36℃,其中培养基初始pH值和发酵温度的影响最显著。在单因素实验的基础上,利用响应面法对培养基各成分的浓度进行了优化。单因素实验表明,植物乳杆菌素LPC718发酵的最优碳源、氮源分别为蔗糖和聚蛋白胨,最适刺激因子为吐温80。Plackett-Burman实验得出,蔗糖、牛肉膏和硫酸镁是影响植物乳杆菌素LPC718产量的三个显著因子。Box-Benhnken实验确定了最适培养基成分为(g/L):蔗糖41.16,酵母粉5.0,聚蛋白胨10,牛肉膏20.49,硫酸镁1.13,磷酸氢二钾2,柠檬酸二铵5,乙酸钠5,硫酸锰0.25,吐温805ml。
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