苏云金芽胞杆菌杀线虫晶体蛋白在拟南芥中的表达

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植物寄生线虫是一种严重威胁农业生产的植物病原物,每年在全世界范围内造成巨大的经济损失,培育苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)抗线虫转基因植物,将会成为防治植物寄生线虫的有效手段。利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)这种模式植物作为寄生线虫的宿主,不仅为构建Bt抗线虫转基因植物提供了模型,而且有利于研究Bt杀线虫机理。   我们已经筛选获得了对秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)高效的苏云金芽胞杆菌杀线虫晶体蛋白基因cry6Aa2(GenBank登录号为DQ257287),并且利用定点突变技术获得了杀线虫活性增强的突变子。   本研究参照拟南芥密码子使用情况和植物基因组特点,全基因合成了去除稀有密码子和不稳定元件的突变子基因,并将修饰改造后的cry6Aa2突变子基因与植物全株表达载体PBA002相连,利用农杆菌介导的转化方法转入拟南芥,通过PCR和Western Blotting技术分别在DNA和蛋白水平筛选表达Cry6Aa2突变蛋白的植株。用南方根结线虫(Meoidogyne incognita)侵染转基因拟南芥,结果显示转基因植株根结减少,具有一定的抗植物根结线虫的作用。   本研究在国内首次将Bt杀线虫晶体蛋白转入拟南芥这种模式植物中,为植物寄生线虫的防治和转基因植物的构建提供了参考,同时为深入研究植物线虫和转基因抗虫植物的互作关系奠定了基础。
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