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禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)同属于家禽的逆转录病毒,两者均可致鸡群发生肿瘤和严重的免疫抑制并主要通过垂直传播方式感染鸡群。通过鸡胚垂直传播感染ALV和REV的鸡群,通常会产生严重的免疫抑制现象,一方面造成鸡群对其它疫苗的免疫应答水平下降,无法产生足够的保护效力,另一方面导致鸡对其他疾病的抵抗力降低,增加了其他继发性疾病感染的几率。为了防控鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)等烈性病原,临床上需要大量免疫针对NDV的灭活疫苗和弱毒疫苗。临床实践发现,某些ALV和REV等潜伏感染的病毒显现症状发生在雏鸡免疫新城疫弱毒疫苗之后,推测La Sota疫苗的免疫会加速ALV和REV在体内的复制和致病。为此,本研究通过系统的动物实验,观察了J亚群ALV(ALV-J)和REV两种垂直传播性逆转录病毒通过鸡胚感染后的SPF雏鸡在接种新城疫弱毒疫苗La Sota株后的协同致病作用。从100枚SPF鸡胚中随机选择50枚SPF鸡胚通过卵黄囊接种ALV-J,剩余50枚SPF鸡胚通过卵黄囊接种灭菌PBS。待孵化出雏后鸡胚接毒组和空白鸡胚对照组各取20只SPF鸡于7日龄时免疫新城疫弱毒疫苗(La Sota株),同时鸡胚接毒组和鸡胚对照组各取20只SPF鸡于7日龄时接种PBS作为免疫对照。结果显示,经鸡胚接种感染了ALV-J而孵化出的SPF鸡体重均低于接种PBS对照组,说明ALV-J经鸡胚感染会对鸡体重增长产生较强的抑制作用,而且这种体重的差距随着时间推移有逐渐加大的趋势,在3W、4W、5W、6W四个时间点两组的平均体重分别相差14.48g、13.99g、50.60g、56.85g。当对上述感染ALV-J的鸡免疫La Sota疫苗后其体重下降趋势更加明显,即ALV-J/La Sota组鸡的体重又低于ALV-J组,说明La Sota疫苗免疫后与ALV-J发挥了协同作用加剧了对鸡体重增长的抑制。经鸡胚接种感染了ALV-J而孵化出的SPF鸡相对于接种PBS对照组分别在3W和6W时观察到明显的脾脏肿大和胸腺的萎缩,再免疫La Sota疫苗后使脾脏肿大加剧,特别是在6W时更加显著。La Sota疫苗免疫未感染的SPF鸡后NDV抗体滴度在3W时达到了高峰,之后逐渐下降,同时期感染ALV-J的SPF鸡NDV抗体滴度均不同程度的低于对照组,3W、4W、5W时NDV抗体滴度平均值分别相差1.369、1.682和0.215个log2,低日龄时NDV抗体水平下降导致鸡群对NDV更加易感。以荧光定量PCR检测血液中ALV-J病毒载量,在3W之前,两组SPF鸡血液中病毒载量几乎无差异,在4W时,免疫La Sota疫苗组SPF鸡血液中ALV-J的病毒载量高于未免疫组,说明免疫La Sota疫苗促进了ALV-J在体内的复制。按照与上述实验类似的分组和实验操作,我们进一步通过动物试验观察了REV与新城疫弱毒疫苗La Sota株的协同致病作用并观察到类似的规律。四个实验组的SPF鸡在7日龄免疫La Sota疫苗之前均没有死亡,在整个实验期间,仅仅免疫La Sota组和完全空白组(PBS组)始终没有出现任何死亡。感染REV的雏鸡在免疫La Sota疫苗后第10天率先开始出现死亡,间隔很长时间后仅感染REV而不免疫La Sota疫苗的雏鸡才开始死亡,显示La Sota疫苗的免疫加速了已感染REV雏鸡的死亡。在感染后的2至6周内,仅仅感染REV组的SPF鸡体重始终显著低于不感染REV的空白对照组,随着时间延长差异越明显。特别是感染REV组SPF鸡再免疫La Sota疫苗后其体重增重更加缓慢,在各组中始终是最低的。和完全空白组相比,通过鸡胚感染REV的SPF雏鸡免疫器官出现了损伤,包括脾脏的肿大、胸腺与法氏囊的萎缩;当感染REV的SPF鸡再接种La Sota疫苗后SPF鸡免疫器官的损伤更加明显,表明SPF鸡体内的REV和免疫的La Sota弱毒二者同时存在时明显加重了对免疫器官的损伤。针对NDV的抗体效价测定结果显示:感染REV雏鸡免疫NDV抗体水平比空白SPF鸡仅免疫NDV组抗体水平出现了显著的持续性下降,特别是REV的早期感染对NDV疫苗的影响非常明显。应用荧光定量方法检测不同器官中REV病毒载量,La Sota/REV组REV病毒载量始终高于REV感染组,这说明La Sota免疫能够促进REV在SPF鸡体内复制。本研究通过模拟动物试验观察了鸡胚垂直传播感染的ALV-J或REV对La Sota疫苗免疫具有显著的抑制作用,免疫La Sota疫苗后增强了鸡体内ALV-J或REV的复制并且两者协同作用增强了对SPF鸡体重的抑制作用和免疫器官的损伤,提示我们要高度重视种源垂直传播性病原的净化工作。