目的观察超重/肥胖相关高血压病人群的中医体质分布特征,并初步进行分析;冷刺激和β3-肾上腺素能受体激动剂能激活白色脂肪组织中米色脂肪细胞的生物合成。两种条件还能诱导白色脂肪组织中炎性因子的表达。低程度的炎症可能会进一步促进白色脂肪组织的棕色化。然而,调和这两种生物过程的机制仍有待阐明。在这项研究中,我们旨在研究多胺分解代谢中的限速酶亚精胺-精胺N1-乙酰转移酶(SAT1)在调节米色脂肪细胞的生物合成以及炎症中的作用并初步探讨了中药单体黄连素对米色脂肪细胞生物合成的调控机制。方法1临床研究研究对象招募时间从2017年6月3日到2017年6月29日,我们在距离南京约70公里的江苏省镇江市丹阳市车站社区,邀请所有大于30岁的居民参加本研究(n=1154)。共1035名居民(89.7%)参加了本研究,填写了《临床资料信息调查表》,对患者的人口学资料、发病情况、辅助检查、用药情况、中医体质等方面资料进行描述性统计,通过面色、舌苔、脉象的采集结合我院体检中心的体质检测仪综合分析高血压患者及高血压并发腹型肥胖患者的中医体质分布特点,以及与性别、年龄及内脏脂肪检测指标(包括内脏脂肪面积、皮下脂肪面积和内脏脂肪面积与皮下脂肪面积的比值)的相关性。2实验研究我们把条件性SAT1flox/f1ox基因小鼠和Adiponectin-Cre工具小鼠进行杂交,进而得到Adiponectin-Cre;SAT1flox/flox(SAT1-aKO)小鼠,这是脂肪组织SAT1特异性敲除的小鼠。通过脂肪组织SAT1特异性敲除的小鼠(SAT1-aKO),研究代谢表型。从腹股沟白色脂肪组织中提取原代前脂肪细胞,并把它们分化成脂肪细胞来研究米色脂肪细胞的生物合成。结果1临床研究1)本次研究共纳入患者1035例;诊断为高血压病的患者共430例;男211例,女219例;男性平均年龄57.7±7.8岁;女性平均年龄57.0±7.8岁;整体平均年龄57.4±7.8岁;在430例高血压患者中,新确诊的患者为162例,其余268例患者的高血压病史平均为9.5±8.3年;高血压1级314例,高血压2级25例,高血压3级3例,服药后血压达标患者88例;合并冠心病者9例,脑血管病者23例,糖尿病者54例,其他病者(慢性肾脏病)6例。2)根据体质量数分析,正常体质量数高血压患者153例,占35.6%;超重高血压患者203例,占47.2%;肥胖高血压患者74例,占17.2%。3)根据腰围分析,高血压非腹型肥胖患者135例,占其中31.4%,高血压并发腹型肥胖295例,占68.6%。其中,高血压非腹型肥胖组:男性65例,占48.2%;女性70例,占51.8%;平均年龄58.0±7.4岁;高血压并发腹型肥胖组中:男性146例,占49.5%;女性149例,占50.5%;平均年龄57.1±7.9岁。4)高血压患者9种基本体质类型的分布特点为:平和质占38.14%,8种偏颇体质占61.86%,各偏颇体质比例由高到低为:痰湿质>阴虚质>阳虚质>气虚质>湿热质>气郁质、特禀质>血瘀质,而非高血压患者基本体质类型的分布特点为:平和质占36.33%,8种偏颇体质占63.67%,各偏颇体质比例由高到低为:阳虚质>痰湿质>阴虚质>气虚质>湿热质>血瘀质>气郁质、特禀质。提示高血压患者和非高血压患者的中医体质分布类型存在显著差异(P<0.01)。5)高血压并发腹型肥胖者中9种基本体质类型的分布特点是:平和质占37.63%,8种偏颇体质占62.37%,各偏颇体质比例由高到低为:痰湿质>阴虚质>阳虚质>气虚质>湿热质、气郁质>特禀质>血瘀质,而高血压非腹型肥胖者中基本体质类型的分布特点为:平和质39.26%,8种偏颇体质占60.74%,各偏颇体质比例由高到低为:阳虚质>阴虚质>痰湿质>气虚质>湿热质、特禀质>气郁质>血瘀质。提示高血压并发腹型肥胖者和高血压非腹型肥胖者的中医体质分布类型存在显著差异(P<0.01)。6)按性别划分,男性高血压并发腹型肥胖者中9种基本体质类型的分布特点是:平和质占38.69%,8种偏颇体质占61.31%,各偏颇体质比例由高到低为:痰湿质>阴虚质>阳虚质>气虚质,而女性高血压并发腹型肥胖者中基本体质类型的分布特点为:平和质41.13%,8种偏颇体质占58.87%,各偏颇体质比例由高到低为:痰湿质>阴虚质>阳虚质>气虚质。提示虽然本实验中高血压并发腹型肥胖者中医体质分布与性别的相关性未见显著差异,但存在相关性的趋势。7)按年龄划分,60岁前高血压并发腹型肥胖者中9种基本体质类型的分布特点是:平和质占66.67%,8种偏颇体质仅占33.33%,各偏颇体质比例由高到低为:阳虚质>气虚质>阴虚质、痰湿质;而60岁后高血压并发腹型肥胖者中基本体质类型的分布特点为:平和质7.20%,8种偏颇体质占92.80%,各偏颇体质比例由高到低为:痰湿质>阴虚质>阳虚质、气虚质。提示高血压并发腹型肥胖者中医体质分布与年龄相关(P<0.01)。8)高血压患者中医体质分布与内脏脂肪面积、皮下脂肪面积相关(P<0.01),与内脏脂肪面积/皮下脂肪面积的比值无相关性。9)高血压并发腹型肥胖患者中医体质分布与内脏脂肪面积相关(P<0.01),与皮下脂肪面积、内脏脂肪面积/皮下脂肪面积的比值无相关性。2实验研究1)实验研究中发现冷刺激和β3受体激动剂诱导腹股沟白色脂肪组织中SAT1的表达和酶的活性。2)高脂饮食喂养脂肪组织SAT1基因特异性敲除(SAT1-aKO)小鼠后出现迟发性肥胖以及冷刺激诱导后的米色脂肪细胞合成及能量代谢受损。3)冷刺激后SAT1-aKO小鼠的腹股沟白色脂肪组织的RNA测序分析显示除了和米色脂肪细胞合成相关的代表基因外,在下调的基因中免疫应答的标志物高度富集。4)在分化的脂肪细胞中,SAT1基因的过表达或通过N1,N11-二乙基精胺(DENSpm)的药物性激活增加耗氧量以及米色脂肪细胞标志物UCP1和PGC1-α基因的表达水平。5)用N1,N11-二乙基精胺(DENSpm)诱导脂肪细胞也可以增加炎症相关基因的表达水平。6)在脂肪细胞中SAT1基因的激活可以增加过氧化氢的生成。而抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)消除了增加的UCP1基因表达并逆转由SAT1激活诱导的一些炎症基因的表达。7)在分化的脂肪细胞中,黄连素可以诱导SAT1的激活以及增加米色脂肪细胞标志物UCP1基因的表达水平。8)在脂肪细胞中,SAT1基因表达的下调可以降低黄连素诱导的UCP1基因的表达水平。结论1临床研究高血压患者与非高血压患者、高血压并发腹型肥胖与高血压非腹型肥胖者的中医证型分布存在显著差异,高血压并发腹型肥胖的体质分布特点与性别、年龄、内脏脂肪分布情况相关,为临床更有针对性的对不同阶段、不同分型高血压并发腹型肥胖的预防及治疗提供了基础。2实验研究SAT1介导的多胺分解代谢可以促进米色脂肪细胞的生物合成。这是由脂肪细胞中SAT1诱导的ROS产生所直接介导的。而SAT1诱导的炎症和免疫细胞浸润也可能间接影响米色脂肪细胞的生物合成。黄连素可以通过增加SAT1基因的表达促进米色脂肪细胞的生物合成。因此本研究认为SAT1介导的分解代谢可以被视作冷暴露和β3-肾上腺素能受体激动剂诱导的米色脂肪细胞生物合成的新型机制,而黄连素可能通过增加SAT1的生成来促进米色脂肪细胞的生物合成。