目的:构建COX-2sh RNA真核表达载体研究COX-2sh RNA对HSC-T6衰老的影响,从细胞和分子水平探讨沉默COX-2对HSC-T6衰老可能的调节机制。方法:1.以大鼠肝星状细胞HSC-T6为实验对象,实验共分四组:空载体组、COX-2sh RNA组、空载体+Fumonisin B1组、COX-2sh RNA+Fumonisin B1组。2.将构建的p Yr-1.1COX-2sh RNA质粒通过Lipofectamine TM2000转染入大鼠HSC-T6,在倒置荧光显微镜下观察转染效率。3.β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老。4.Q-PCR检测肝星状细胞COX-2、LASS2、p21、Rb1的表达。结果:1.在荧光显微镜观察示COX-2sh RNA转染效率达70%以上;2.β-半乳糖苷酶染色示与空载体组相比,COX-2sh RNA组肝星状细胞衰老显著增加(p<0.01),与COX-2sh RNA组相比,COX-2sh RNA+FB1组细胞衰老程度下降(p<0.01)。3.Q-PCR结果示与空载体组比较,COX-2sh RNA组Rb基因表达上调,COX-2基因表达下调(p<0.01),p21基因表达下调(p<0.05),空载体+FB1组LASS2基因表达下调(p<0.05);与COX-2sh RNA组比较,COX-2sh RNA+FB1组Rb基因表达下调、p21基因表达上调(p<0.01);LASS2基因表达下调、COX-2基因表达上调(p<0.05)。结论:1.沉默COX-2能够促进HSC-T6衰老。2.抑制神经酰胺合成酶活性能逆转COX-2sh RNA对HSC-T6衰老的促进作用,提示沉默COX-2可能通过神经酰胺途径发挥促HSC-T6衰老作用。