自体富血小板膝关节内移植修复兔损伤半月板的初步研究

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目的:观察兔自体富血小板血浆(Platelet-Rich Plasma PRP)对其半月板损伤模型修复的影响,探讨PRP促进半月板损伤愈合的能力,为临床应用PRP治疗半月板及软骨损伤提供有价值和实用意义的实验资料。方法:实验用6月龄健康的雄性中国大白兔共20只:首先用2只以微创的方式构造半月板无血供区损伤模型,同时判断其造模的可靠性和可行性;所余18只实验兔随机分成A、B、C 3组,每组6只。每只兔统一以实验前肯定的造模方式同时作左、右侧膝关节外侧半月板体部横向损伤模型。将每只兔左膝关节外侧半月板作为实验侧,右膝关节外侧半月板作为对照侧;取兔自体全血7ml,分两次离心获取约1ml PRP,通过血小板计数分析、验证制备PRP的有效性,备用。左膝关节外侧半月板损伤造模成功后,悬浮后的PRP以直接注射入关节腔的方式移植该兔左侧关节腔。右膝关节外侧半月板损伤造模后完全不干预,待其自然愈合。所有移植PRP的实验兔的膝关节均给予外固定至处死。移植PRP的实验兔均肌注庆大霉素五天以预防可能的感染。所有移植PRP实验兔均无感染及死亡;A组1周后处死,B组2周后处死,C组3周后处死。每只移植PRP实验兔双侧膝关节外侧半月板作大体、组织学检查评估,并对结果进行统计学分析。结果:一、大体观察结果:1、实验动物膝关节均无感染;2、造模损伤半月板的变化:1)A实验组与A对照组造模损伤后半月板在伤后1周均未见任何愈合迹象;2)B实验组与B对照组造模损伤后半月板在伤后2周均亦未见明显愈合相,但实验组有部分半月板裂口见纤维肉芽组织增生充填;3)C实验组造模损伤后外侧半月板在伤后3周可见明显的纤维组织与纤维肉芽样组织增生,并可以看到增生细胞充填与连接,表明造模损伤的半月板趋向愈合;C对照组造模损伤的外侧半月板在伤后3周未见愈合迹象。半月板愈合情况统计分析显示:对大体观察,具有统计学意义(P<0.05)。二、组织学观察结果:1、实验组半月板损伤处在伤后1、2周时未见愈合,在伤后3周出现肉芽样组织细胞的增殖;光镜下示:在伤后1周实验组半月板裂口边缘可见纤维软骨细胞增生及成纤维细胞增生;在伤后2周实验组半月板裂口有机化组织充填,但未全部愈合,边缘可见少许纤维软骨细胞增生及成纤维细胞增生,半月板外侧见滑膜细胞增生、炎细胞浸润、微血管出现;在伤后3周实验组损伤处裂口由机化血凝块组织填充裂口连接愈合,裂口边缘组织出现不典型的幼稚纤维软骨细胞,边缘有胶原纤维组织和纤维软骨细胞增生,有少许炎细胞浸润,血管从周围长入。2、对照组在伤后1周裂口处均未见明显成纤维细胞增生及纤维软骨细胞增生;在伤后2周裂口处均未见明显成纤维细胞增生及纤维软骨细胞增生、有少许炎细胞浸润未见微血管;在伤后3周半月板损伤处裂口未见机化血凝快,边缘组织有炎细胞浸润,未见软骨细胞及胶原纤维组织增生,无血管长入,关节内有少许淡黄色澄清液体。结论:应用自体PRP关节腔内移植,三周后开始,发现造模损伤的外侧半月板损伤区域有明显的纤维组织细胞与纤维肉芽样组织增生,并可以看到软骨细胞充填与连接,表明PRP能够刺激半月板损伤区域的软骨细胞增生,促进造模损伤的无血供区半月板的愈合,具有修复兔半月板无血供区造模损伤的作用。动物实验表明及实验结果推断,自体PRP关节腔内移植,能有助于半月板损伤的修复,因此,本实验对于以后PRP自体关节腔内移植治疗半月板损伤技术的推广和应用,具有十分有价值的临床意义。
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