Ror2（The receptor tyrosine kinase-like orphan receptor）是RTKs家族中的一员，为单次跨膜受体，在人类的骨骼发育和癌症发生中发挥了十分重要的作用。在哺乳动物例如小鼠中，Ror2突变体小鼠呈面部畸形，四肢和尾部短小，呼吸系统功能障碍，最终导致新生小鼠致死。在爪蛙中的研究发现，XRor2及其突变体干扰了原肠期的汇聚延伸运动。因此，Ror2在早期胚胎发育过程中可能发挥了重要作用，所以我们利用斑马鱼胚胎体外发育及早期透明等优势，对Ror2在早期胚胎发育中的功能进行深入研究。前人研究已经发现，Ror2在小鼠和爪蛙中作为一类非Frizzled受体，能够与Wnt5a相互作用调节CE运动。汇聚延伸（CE）运动是原肠胚期的一种重要的细胞运动形式，在脊椎动物早期胚胎发育过程中发挥了十分重要的作用。值得注意的是，多种遗传学证据强调了在斑马鱼胚胎原肠胚期调节CE运动的重要性。虽然Ror2在小鼠和爪蛙中能够与Wnt5a相互作用调节CE运动，然而斑马鱼中，Wnt5a在原肠胚时期的表达量很低，而且Wnt5a敲降后也没有引起CE缺陷的表型。然而斑马鱼中Wnt11的突变体slb显示了缺陷的CE运动，之前的研究发现，斑马鱼Wnt11能够与Frizzled-7和Flamingo相互作用调节细胞运动，那么斑马鱼中Wnt11是否能通过Ror2发挥功能呢？Hiroki Hikasa等研究表明XRor2与XWnt11，Xfz7的共过表达能够协同抑制汇聚延伸运动。生化实验表明，XRor2的胞外结构域CRD能够与XWnt11相结合，这一研究结果为我们提供了一些信息，但是并未有研究报道Wnt11和Ror2体内的相互作用功能。因此，以上的论述使我们提出了一些疑问，在斑马鱼中Ror2是否能够在CE运动中发挥功能? Wnt11对CE运动的调节作用是否是通过Ror2的介导？Ror2与Wnt11是否能够相互结合？这些问题目前还没有得到解答。本研究的目的就是对上述疑问依次进行探讨。我们首先克隆得到了斑马鱼的Ror2基因，通过序列比对发现斑马鱼Ror2与人、小鼠和爪蛙的Ror2同源性极高。通过RT-PCR分析显示，Ror2为母源性基因，且随后的各胚胎时期均有表达，并且值得一提的是，Ror2在6-9hpf表达量较高，这暗示着Ror2有可能在原肠胚期发挥作用。Ror2的过表达抑制了胚胎在原肠胚期的汇聚和迁移，导致了严重的CE缺陷表型，暗示着Ror2在原肠胚期的CE运动中发挥了一定的调节作用。Ror2和Wnt11共过表达能协同加强CE缺陷表型，并且原位杂交markers（hgg、dlx3b、ntl）检测也证明了这一结果，这暗示着斑马鱼Wnt11可能通过Ror2调节CE运动。Ror2MOs敲降实验显示，在原肠胚期Ror2敲降后并没有导致CE缺陷，产生这一结果的原因，我们猜测是由于胚胎中存在Ror2的母源性蛋白，而TB MO并不能将其母源性蛋白封闭住，因此敲降表型不明显。所以，我们随后又改用Ror2dominant negative形式Ror2-TM进行敲降。结果显示，dnRor2能够导致较为严重的CE缺陷，并且随后的时期胚胎眼部间距变窄，甚至出现独眼表型，表型与wnt11/silberblick突变体表型类似，暗示着斑马鱼Wnt11可能会通过Ror2调控CE运动。因此我们同样将Wnt11MO和dnRor2进行低剂量共显微注射，结果同样表明两者的协同加成作用，并且进一步暗示了Wnt11与Ror2的相互作用。而Wnt11mRNA与dnRor2共过表达，显著削弱了Wnt11mRNA引起的CE缺陷的表型，这一研究从另一方面暗示了两者的相互作用性。因此为了直接证明这一假设，我们运用co-ip实验进行验证，结果也证明了Wnt11的确能够与Ror2相结合。为了进一步研究Wnt11通过Ror2调控CE运动过程中发挥重要作用的位点，我们构建了Ror2突变体，结果表明Ror2-Y647和-S863位点均能在此过程中发挥作用。通过以上研究表明，在斑马鱼中，Wnt11能够与Ror2结合，从而调控了原肠胚期的汇聚延伸运动，而且这一调控作用中Ror2的Y647和S863位点是不可缺少的。这一研究结果不仅进一步认识了汇聚延伸这种重要的细胞运动形式，开拓了脊椎动物中对汇聚延伸运动的研究视野，而且对脊椎动物的早期胚胎发育研究提供了一定的理论依据。