【摘 要】
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竹节参皂苷Ⅳa（CHS-Ⅳa）作为广泛存在于竹节参等五加科草本植物中的一种皂苷类化合物,具备调节血糖、调节血脂等多种药理活性。IPEC-J2细胞属于仔猪空肠上皮细胞系,与大部分的猪肠道疾病紧密相关,更是被普遍用于猪肠道炎症及通透性的研究。探究天然药物分子对过氧化氢致猪小肠细胞损伤的作用,可为临床上预防和治疗动物疾病提供依据。本研究采用体外培养IPEC-J2细胞,探讨H2O2作用不同时间及浓度条件下
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竹节参皂苷Ⅳa（CHS-Ⅳa）作为广泛存在于竹节参等五加科草本植物中的一种皂苷类化合物,具备调节血糖、调节血脂等多种药理活性。IPEC-J2细胞属于仔猪空肠上皮细胞系,与大部分的猪肠道疾病紧密相关,更是被普遍用于猪肠道炎症及通透性的研究。探究天然药物分子对过氧化氢致猪小肠细胞损伤的作用,可为临床上预防和治疗动物疾病提供依据。本研究采用体外培养IPEC-J2细胞,探讨H2O2作用不同时间及浓度条件下对IPEC-J2的影响,以及CHS-Ⅳa对H2O2作用下IPEC-J2的影响。试验中采用MTT细胞增殖试验测定细胞活性,利用细胞划痕试验研究CHS-Ⅳa对于IPEC-J2细胞损伤修复的影响。采用比色法检测细胞上清CAT、SOD、Trx R、GSH酶活力,2,4-二硝基苯肼法检测细胞上清LDH活力,比色法检测细胞培养上清中MDA含量。Real-time PCR检测IL-6、IL-α、TNF-α、P65、NF-κB m RNA相对表达,Western-blot检测P65蛋白相对表达。结果显示:浓度为1000μM的H2O2在短时间2 h处理下可使IPEC-J2细胞活性降低至50%左右。低浓度50μg/m L～100μg/m L CHS-Ⅳa在短时间内对IPEC-J2细胞活性具有促进作用,亦能促进其损伤修复。高浓度200μg/m L的CHS-Ⅳa对细胞具有明显的毒副作用。80与100μg/m L CHS-Ⅳa对H2O2作用后IPEC-J2细胞的氧化还原系统表现出调节作用,能使H2O2造成的氧化损伤得以改善;1000μM H2O2作用下的IPEC-J2细胞培养上清中LDH活性与MDA含量出现明显上升,但在CHS-Ⅳa进行处理后,其培养上清中活性出现下降;GSH、CAT、SOD以及Trx R活性变化则与之相反。同时80与100μg/m L CHS-Ⅳa处理H2O2致损的IPEC-J2细胞后,其相关炎症因子m RNA及蛋白表达量皆出现明显下调。
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