液态和隔膜防粘连材料防止兔子宫术后盆腔粘连的基础研究

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目的在实验动物大耳白兔体内构建子宫术后盆腔粘连的动物模型,进一步进行大体和组织学观察以了解粘连随时间的变化情况并评价液态和隔膜两种防粘连材料对于防止子宫创面术后盆腔粘连的效果,探讨其可能的机制。方法制备大耳白兔双子宫角创伤术后盆腔粘连模型,对其围手术期以及盆腔粘连情况进行观察。分别于术后3天、1周、2周、4周、6周不同时间段处死并观察实验动物盆腔粘连情况并评分,同时取子宫、膀胱腹膜反折、直肠窝三个部位行HE染色和NF免疫组织化学染色,进行组织学动态观察并评价两种防粘连材料对盆腔术后粘连的预防效果,取腹水进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其组织型纤溶酶原激活物(tPA)含量。结果1.手术建模过程顺利,大耳白兔双子宫角模型可在三维状态下评价其盆腔粘连形成情况并且家兔的纤溶系统更接近人类,因此大耳白兔双子宫角模型是理想的妇科术后粘连的动物模型;而纱布磨损、针持夹伤和直接损伤缝合均可以引起大耳兔子宫手术后盆腔粘连,其中直接损伤大耳兔子宫更能模拟妇科术后盆腔情况。2.术后3天是纤维蛋白吸收的关键时期,此期残留的纤维蛋白将成为纤维粘连的基础。7天是腹膜间皮修复所需要的时间,而胶原在术后14天左右达峰,因此选择术后14天能观察粘连中胶原变化情况。到了术后4周防粘连材料应已完全吸收,此时进行观察可以证实其防粘连效果以及防粘连材料的吸收。术后42天则能帮助了解在防粘连材料消失后其防粘连效果是否能持续存在。3.术后7天以内粘连的范围和类型评分均略有增加,其后粘连范围稍有下降,而粘连类型此时保持稳定,在14~28天粘连的范围和类型均有所增加,其后再次下降;而粘连的韧性评分在术后3~14天逐渐升高,其后处于平台期,而在28天以后与范围和类型评分一样出现下降;病理学检查发现炎症反应随时间逐渐减弱,而纤维增生在术后28天内逐渐下降,其后略升高,新生血管评分在术后7天后基本保持稳定。4.术后3天和28天时液态和/或隔膜防粘连材料组其粘连范围和类型评分均显著低于对照组,隔膜和/或液态防粘连材料的韧性评分在各个时间段均显著优于对照组,提示这两种材料对于预防粘连是有效的;而病理学检查发现术后3天液态和/或隔膜防粘连材料能显著减轻粘连部位的炎症反应,术后3天、7天和42天液态和/或隔膜防粘连材料能显著降低粘连部位的纤维增生。5.NF免疫组织化学染色显示:术后7天即可在纤维粘连及渗出中观察到细小的神经纤维样结构的出现,与新生血管伴行。6.大耳白兔动物模型子宫术后在体腹水tPA水平存在类似的随术后时间的变化趋势:在术后3天纤溶系统激活时开始升高,到了术后7天时有轻微的下降,而在术后14天达峰,之后逐渐下降。7.但在各时间点,对照组、液态防粘连组和隔膜防粘连组之间tPA水平的差异均无显著性。结论1.直接损伤大耳白兔双子宫角模型是理想的妇科术后粘连实验动物模型。2.术后3天、1周、2周、4周及6周五个观察时间点可以帮助全面了解盆腔粘连的形成过程。3.大耳白兔动物模型子宫手术后大体盆腔粘连的范围、类型和韧性评分以及病理的炎症、纤维增生和新生血管评分均随时间发生变化。4.不同时间点,两种防粘连材料在粘连的类型和韧性方面均显著优于对照组,同时病理检查显示其能显著降低多个时间点粘连内的纤维增生水平,提示这两种防粘连材料可能通过多种机制发挥其防粘连作用。5.粘连中发现的神经纤维可能是术后盆腔疼痛的原因。6.在体大耳白兔动物模型子宫手术后腹水tPA浓度随时间发生变化,术后14天tPA的浓度达峰;7.对照组、液态防粘连材料组和隔膜防粘连材料组在不同时间点其在体腹水tPA的浓度均无显著性差异,提示这两种防粘连材料的防粘连作用可能不是通过影响纤溶系统来实现的。
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