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诺如病毒(Norovirus，NoV)原名诺瓦克样病毒(Norwalk-like virus，NLV)，属杯状病毒科(Calici virus，HuCV)，诺如病毒属。诺如病毒是全球范围内引起人类急性胃肠炎的最重要的病原之一，可导致严重的公共卫生问题，不仅因为它的影响范围广，而且因为高度变异，具有传染性和抵抗力的新变异的重组株的出现，而导致全球的流行。在世界范围内，诺如病毒感染可能占所有由食物引起疾病暴发的50％以上。我国一些地方也有该病毒感染局部集体性暴发的报道。其中，1990年代中期一种特异性的诺如病毒株(GII/4)是造成世界范围内感染爆发的主要基因群，由于这个病毒株一直在进一步进化，至今它仍旧是世界多个地区诺如病毒爆发的主要原因。
近年来，诺如病毒感染性腹泻发病呈逐渐升高的趋势，但其基础研究却因为此病毒不能培养而一直滞后，这直接影响了研究者们对该病毒疾病的系统研究和检测。诺如病毒被发现的近20年里，研究者们未能发展一种简单有效的方法来检测这类病毒。目前，国际上研究者们对诺如病毒的免疫学方面研究主要集中在单克隆抗体和表位确定等，希望发现具广泛识别能力的单克隆抗体并确定其表位，最终能够应用于诺如病毒疫情爆发时的快速检测中。
为了获得病毒的原始信息，参考GenBank上的诺如病毒MD145-12基因组设计分段扩增引物，利用RT-PCR方法从急性水样便腹泻患儿的粪便中克隆了诺如病毒GII组4型病毒广州株(NVgz01)的全基因组并进行了序列分析，并确定了其核衣壳蛋白(Capsid Protein)基因全长1623bp，位于基因组中5085-6707nt之间。将此全长C蛋白基因克隆到表达载体pET28a(+)上，经IPTG诱导表达后，利用Ni2+亲和层析柱对重组C蛋白进行纯化，并用Westernblot和ELISA方法检测其抗原性。结果表明重组诺如病毒C蛋白基因在大肠杆菌中可以高效表达，其相对分子质量(M1)为62×103，可在Ni2+亲和层析柱上高度纯化。经抗原检测试剂盒检测和免疫学方法分析，均表明重组C蛋白具有良好的抗原性。
为了建立能稳定分泌抗诺如病毒C蛋白的单克隆抗体(MAbs)细胞株，我们用纯化的重组C蛋白免疫BALB/c小鼠，通过PEG使小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合，并使用HAT选择性培养基培养融合细胞，用间接ELISA和Westernblotting测定单克隆抗体的效价、免疫球蛋白亚型和单克隆抗体的特异性。结果共筛选出4株分泌抗重组C蛋白抗体的杂交瘤细胞株N2C3、N7C2、N4B1、N8A9。间接ELISA和Westernblotting检测结果表明，这4株单克隆抗体都可以与重组C蛋白产生特异性反应，并且能与天然粪便标本中的GII组诺如病毒产生特异性反应。
为了确定MAbN2C3对不同株诺如病毒的识别范围，首先要鉴定N2C3所识别的表位。将GII/4株诺如病毒的核衣壳蛋白分段克隆到pGEX-4T3载体中，通过N2C3对不同片段表达产物的识别及竞争抑制实验，确定此N2C3识别的表位序列在GII/4株中为55WIRNNF60，并首次发现此表位同时出现在GII/7、GII/8、GII/10、GIl/13和GII/16中。其次，通过序列比对，确定了此表位在诺如病毒GI组、GII组、GIII组和GV组的主要代表株中，共10种的氨基酸排列。通过对这10种表位进行克隆，表达，最终确定MAbN2C3可以识别的诺如病毒株为：GI/1、GI/2、GI/4、GI/5、GII/6、GII/7、GII/8、GII/10、GII/1、GII/2、GII/3、GII/4、GII/7、GII/8、GII/10、GII/13、GII/16及动物诺如病毒组中的JV(GIII/I和GIll/2)和MVN(GV/1、GV/5和GV/6)，这也是目前文献报道中识别范围最广的单克隆单体株。由于我国诺如病毒主要流行株为GII/4、GII/3、GII/1和GII/7(占95.8％以上)，至此，能够广泛识别诺如病毒株，尤其是能够全部识别我国主要诺如病毒流行株的单克隆抗体N2C3的制备和鉴定，为诺如病毒抗原检测技术的建立奠定了坚实的基础，同时也为诺如病毒的基础研究工作提供了必要的材料。