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目的：了解上海市三家医院医护人员手卫生和医院环境消毒水平,及病原菌分布情况,评价医院消毒工作质量,发现医院感染的危险因素,为改进医院消毒措施和有效控制院内感染提供科学依据。方法：选取本市三家医院,在2010至2012年期间每季度采样一次,采集医护人员手卫生、物体表面、手术室空气、口腔诊疗水、内窥镜、污水及压力蒸汽灭菌器等环节样本,分析其消毒合格率及影响因素,同时对样本进行病原菌的分离和鉴定。结果：1.医护人员手卫生消毒效果共收集手卫生样本558件,总体合格率84.41%。其中外科手样本211件,合格率为93.84%；卫生手监测样品347件,合格率为78.67%。手术室医护人员外科手合格率高于卫生手(χ2=22.928,P<0.001)。手术室医护人员对手消毒时间在80秒至240秒之间,平均156秒。消毒时间不到120秒的监测样本合格率为90.00%,在120秒以上时的合格率为97.30%(χ2=4.845,P<0.05)。儿科病房、特需病房、护士站、ICU、产科病房卫生手合格率均在90%以上,门诊、口腔科、新生儿室的卫生手合格率较差。根据医护人员手卫生行为不同发现,通过洗手的卫生手合格率为79.30%,通过消毒的卫生手合格率为77.50%；手卫生消毒时间超过60秒的卫生手合格率较高(￡=4.483,P<0.05)；选用一次性纸巾干手的卫生手合格率高于选择毛巾干手(χ2=11.191,P<0.01)。2.医院环境消毒效果三年收集监测样本共计1615件,合格率为72.38%,各年合格率逐年提高(χ2=24.18,P<0.01)。其中压力蒸汽灭菌器、污水的合格率最高,分别为100%和94.44%；合格率较差的环节是内窥镜、手术室空气和口腔诊疗水,合格率分别为54.10%、65.42%、66.01%。物体表面合格率为76.97%,其中ICU、外科病房、儿科病房物体表面合格率最低。门把手/扶手是物体表面合格率最低的采样对象。3.医院内分离病原菌分布2010至2012年中的所有监测样本中共发现病原菌95株,革兰阳性菌占24.2%；革兰阴性菌占75.8%。在革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌共检出率最高(7株)；在革兰阴性菌中检出率最高的为大肠埃希菌(11株)。病原菌检出的科室集中在口腔科和病房。在不同采样对象中,桌面/台面、门把手/扶手的病原菌检出比例较高,分别为51.6%、25.8%。结论：1.医务人员外科手的合格率高于卫生手,延长洗手时间能够提高手卫生的合格率,选择一次性纸巾的干手方式也可以提高卫生手的合格率,卫生手合格率较低的科室应作为重点科室加强管理。2.上海市三年间三家监测点的医院消毒与灭菌总体合格率偏低,存在问题较多,口腔诊疗水、内窥镜、手术室空气等环节应予以重视。3.目前医院分离出的病原菌主要以革兰阴性菌为主,应针对病原菌分布的重点科室、重点环节加强清洁、消毒,以降低病原菌污染风险。