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新型检测技术研究为保证我国乳业持续、健康、快速发展起着举足轻重的作用。乳品防伪掺假问题历来都是乳制品质量安全领域重点要解决的问题,尤其是原料乳掺假识别与检测更是羊乳产业的急需技术。羊乳作为陕西省特色资源,其营养方面公认的优势越来越显现出来,市场优势及消费增势明显,受到了各界广泛重视与青睐。然而受利益驱使牛羊乳混掺现象越来越严重,具有潜在的市场危害,已成为一个较为突出的问题,迫切需要更为有效、科学的检测方法。本研究以陕西杨凌及周边地区的牛乳和羊乳为对象,以β-胡萝卜素为特征指标建立了一种基于高效液相色谱技术检测牛羊乳混掺的方法。主要结论如下:(1)采用国家标准(GB 5413.35-2010)方法和本实验优化后的样品处理方法对纯牛乳中β-胡萝卜素含量的测定的结果分别为8.62±0.16 μg/100 g和8.59±0.14 μg/100 g,两种方法无显著性差异(P>0.05),优化方法节约了一半时间,提高了效率,具有比较优势和推广价值;(2)实验优化的检测条件是:流动相:甲醇-乙腈-三氯甲烷:820:60:120(v/v/v);流速:1.5 mL/min;波长:450 nm;柱温:室温;进样量:20 μL。优化后的鲜乳中β-胡萝卜素的检测限为0.31 μg/100mL;该方法重现性好,加标回收率为94.17%,相对标准偏差为2.19%,变异系数(RSD)为1.66%。(3)主产季4-9月份,纯牛乳和纯羊乳中β-胡萝卜素含量变化范围为分别为7.50~13.03μg/100g和0.19~0.22μg/100g,随着季节的变化,富含类胡萝卜素的青饲料和秸秆种类及数量的增多,牛乳中的β-胡萝卜素含量也呈现逐渐递增的趋势。而羊乳中β-胡萝卜素含量并不随季节和饲料的变化而产生明显的浮动,保持在稳定水平,约为0.20μg/100g;二者β-胡萝卜素含量存在显著性差异(P<0.01),为以β-胡萝卜素作为特征指检测牛羊乳混掺提供了科学依据。(4)4~9月份牛羊乳混掺检测的线性方程分别为:Y=7.2402X+0.0311,(R2=0.9972);Y=8.5611X+0.0377,(R2=0.9988);Y=9.424X+0.1196,(R2=0.9959);Y=10.342X+0.1237,(R2=0.9984);Y=11.172X+0.1257,(R2=0.9967);Y=13.064X+0.0301,(R2=0.9958);线性范围吻合牛乳占混合乳比例0%~100%范围;依据线性方程计算出的掺入的牛乳的比例与混合乳样品中牛乳的实际比例的相对误差范围在2.20%~4.74%之间;验证试验表明:当羊乳中掺入5%以上的牛乳时,可实现牛羊乳混掺定量检测;牛乳掺入比例越高,检测的准确度、可信度越高,相对误差越小。