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目的 以聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)为纳米载体材料,制备聚山梨酯80修饰的神经毒素纳米粒(P-80-NT-NP),并考察其理化性质。通过组织分布实验评价其鼻腔给药后的脑靶向性能;通过镇痛实验评价不同给药方式及P-80修饰前后的神经毒素纳米粒的镇痛作用;通过小动物活体成像技术研究其鼻腔给药体内分布情况,为开发其他相关脑靶向新制剂的实验研究提供借鉴和参考。方法 1.以PBCA为纳米载体材料和P-80为修饰材料,采用乳化聚合法制备P-80-NT-NP。通过透射电镜观察其形态;激光粒度测定仪/Zeta电位仪测定其平均粒径和Zeta电位;高速离心法测定其包封率及载药量;2.SD大鼠随机分为两组,分别鼻腔给药P-80-NT-NP和NT-NP,探讨给药后药物在血浆、脑、肝、心、脾、肺、肾中的组织分布规律;3.采用热板法和福尔马林法评价NT不同给药方式的镇痛作用,同时考察P-80修饰前后的神经毒素纳米粒对镇痛效果的影响;4.通过小动物活体成像技术研究P-80-NT-NP鼻腔给药后的体内分布情况。结果 1.P-80-NT-NP外观呈圆形或类圆形,平均粒径为(75.37±1.09)nm,Zeta电位为(-10.96±1.77)mV,包封率和载药量为(70.30±2.69)%,(0.161±0.04)%;2.组织分布实验结果显示,P-80-NT-NP和NT-NP经鼻腔给药后可迅速分布于血浆和各组织中,其中血浆、肝组织和脑组织中含量较高。给药90min后,P-80-NT-NP鼻腔给药组血浆中NT含量高于NT-NP组,具有显著性差异(P<0.01);P-80-NT-NP鼻腔给药组脑内NT含量高于NT-NP组,具有显著性差异(P<0.05);3.小鼠热板试验结果显示,P-80-NT-NP经鼻腔给药90min后痛阈提高率达到高峰,为69.92%;NT经肌肉注射后30-60min内痛阈有较大幅度提高,30min达到高峰,痛阈提高率为63.44%;NT经腹腔注射90min后痛阈提高率达到高峰,为63.97%;小鼠甲醛致痛试验结果显示,第Ⅰ时相,P-80-NT-NP组和NT组比较,能显著抑制小鼠的舔足(P<0.01),抑制率高达52.32%,NT-NP组和NT组比较也有显著性差异(P<0.05);第Ⅱ时相NT-NP组无明显的镇痛作用,而P-80-NT-NP组和NT组比较有显著性差异(P<0.05);4.小鼠活体成像实验结果显示,NT-NP鼻腔给药后随循环系统迅速到达全身,且代谢迅速,P-80-NT-NP组入脑迅速,体内缓释效果明显,半衰期延长,脑靶向性明显强于未经修饰的NT-NP组。结论 1.本实验采用乳化聚合法成功制备了 P-80-NT-NP,其外观呈圆形或类圆形、大小分布均匀、无粘连,稳定性好,粒径小,药物包封率和载药量高,符合脑内递药需求;2.本实验建立的脑、血浆及组织内FITC-NT含量分析的酶标仪方法简便、快速、准确;P-80-NT-NP和NT-NP经鼻腔给药后可迅速分布于血浆和各组织中,其中血浆、肝组织和脑组织中含量较高。提示,NT-NP经P-80表面修饰后,BBB通透性增强,靶向至脑组织分布使药物含量显著增大,由此为P-80-NT-NP的脑靶向性提供实验依据;3.P-80-NT-NP经鼻腔给药后在一定时间范围内,其镇痛起效时间、药效持续时间以及在痛阈提高水平上均优于肌肉注射和腹腔注射,是一种良好的多肽类药物注射给药的替代给药途径;另外,NT-NP经P-80修饰后,有利于药物进入脑内,明显提高镇痛效果;4.本实验成功运用小鼠活体成像技术在活体水平直接观察P-80-NT-NP在小鼠体内的组织分布特征,NT-NP组经鼻腔给药后随循环系统迅速到达全身,且代谢迅速;P-80-NT-NP组在体内缓释效果明显,半衰期延长,脑靶向性明显强于未经修饰的NT-NP组。