【摘 要】
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该研究利用RT-PCR技术,从拟南芥中克隆得到其606bp的保守片段,并将其构建到原核表达载体pET30a(+)中,经过PCR和酶切鉴定表明重组质粒pET-AATP构建正确.将重组质粒转入表达BL2
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该研究利用RT-PCR技术,从拟南芥中克隆得到其606bp的保守片段,并将其构建到原核表达载体pET30a(+)中,经过PCR和酶切鉴定表明重组质粒pET-AATP构建正确.将重组质粒转入表达BL21(DE3)中进行诱导表达,发现分子量为34KD的蛋白经Westernblotting鉴定为His-AATP的融合蛋白.用纯化的His-AATP为抗原制备的抗血清效价为1:64,为质体AATP的定位及功能研究提供了有用的探针.以质体AATP保守片段的抗血清为探针,运用Confocal免疫荧光技术,证实了AATP存在于玉米根毛和蚕豆保卫细胞的叶绿体上.利用纯化的玉米叶绿体被膜增溶蛋白的WesternBlotting进一步证实AATP存在于叶绿体被膜上.
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