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SND1(Staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1)是一种参与基因调控的转录共激活因子蛋白。本研究旨在首先得到SND1基因序列,然后分析其生物学特性,并探讨不同浓度IGF-I、EGF、FGF对其在乳腺上皮细胞表达的影响。采集泌乳期牦牛乳腺组织,用组织块贴壁法和胰蛋白酶消化法获得乳腺上皮细胞,经鉴定后,扩增SND1基因,测序并拼接。用相关生物信息软件分析牦牛SND1基因特性,用免疫组织化学和免疫荧光技术对牦牛SND1基因编码蛋白进行定位分析。向纯化的3代乳腺上皮细胞中分别加入0、50、100、200 ng/m L的IGF-I和EGF,0、25、50、100、200 ng/m L FGF,通过实时荧光定量PCR和免疫荧光检测其对SND1基因和蛋白表达的影响。研究结果显示:(1)体外培养的细胞表达角蛋白18、β-酪蛋白,经鉴定为乳腺上皮细胞。(2)牦牛SND1基因全序列为3294 bp,含有2733 bp的ORF(GenBank登录号:KU884327),共包含20种氨基酸;牦牛SND1基因序列与野牛、家牛、藏羚羊、山羊、猪、野骆驼、马、黑猩猩、人、褐鼠的同源性分别为99%、98%、96%、94%、91%、90%、90%、89%、89%、85%;系统进化树表明与野牛和家牛的进化水平较近,与人和鼠的进化水平较远;SND1基因编码蛋白为非分泌蛋白,非跨膜蛋白;(3)SND1蛋白在分泌上皮细胞(乳腺上皮细胞)和导管上皮细胞呈阳性高表达,在肌上皮细胞呈弱表达,在乳腺上皮细胞胞核高表达,胞质弱表达。(4)IGF-I、EGF、FGF均可提高牦牛乳腺上皮细胞SND1基因和蛋白的表达。200 ng/m L IGF-I实验组,SND1基因和蛋白表达量最高,显著高于其他浓度组(P<0.05);EGF和FGF浓度均为100 ng/m L时,SND1基因和蛋白表达量最高,显著高于其他浓度组(P<0.05)。从本研究得到了包含完整ORF的SND1基因序列,该序列高度保守,同时也存在种属特异性。IGF-I、EGF和FGF生长因子均可在体外调控牦牛乳腺上皮细胞中SND1蛋白的表达,在一定程度上参与SND1生物学功能调控,IGF-I组呈浓度依赖性,EGF和FGF组均有最佳浓度。上述研究结果为进一步探究SND1对牦牛泌乳机能的调节提供了相关依据,也为通过加入外源因子调控泌乳提供可能。