贵州蓝莓菌根真菌多样性及其对蓝莓幼苗生长的影响

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蓝莓(Vaccinium)根系没有根毛,自然生境中通过形成菌根以帮助其吸收水分和营养物质。对蓝莓菌根菌进行深入的研究,及促进菌根在蓝莓上的应用和发展有重要意义。本文对贵州及四川部分地区人工栽培蓝莓根部内生真菌进行分离鉴定及多样性进行研究;并通过回接验证筛选出几种适宜的蓝莓菌根菌,初步分析了这几种菌根菌对蓝莓生长的影响。通过以上研究,以期为开发利用蓝莓菌根菌促进蓝莓生长发育提供基础,主要结果如下:(1)在贵州的麻江、花溪、凤冈、黄平、天柱县(区)以及四川的彭州、雅安、眉山市等区域,采集健康蓝莓根组织进行内生真菌的分离和鉴定。从135份蓝莓根样中,共分离获得1766株内生真菌,分类鉴定属于4个门45个属。包括子囊菌门(Ascomycota)、接合菌门(Zygomycetes)、担子菌门(Basidiomycota)、卵菌门(Oomycota),其中归属于子囊菌门(Ascom ycota)为优势门,包含1602株(IR=89%;IF=90.71%);毛壳属(Chaeto mium spp.)为优势属,共分离出273株(IR=15.17%;IF=15.46%),其次为镰刀菌属(Fusarium spp.),共分离出267株菌(IR=14.83%;IF=15.12%)。(2)通过对比已报道的杜鹃花科植物的菌根菌种类,由1766株内生真菌中,初步鉴定筛选出26株易培养且分离频率较高的内生真菌进行回接试验,15 d后观察菌根侵染情况,对形成菌根的真菌确定为蓝莓菌根菌,发现编号为Y-037、Y-005、X-065、Y-007、Y-078、Y-017、Y-026、Y-079和Y-012等9个处理与根部发生明确的侵染,初步鉴定为菌根菌;9个菌株分别鉴定为Cladosporium sp.、Whalleya microplaca、Phialocephala fortinii、Acephala sp.、Rhizopycnis vagum、Helotiales sp.、Phialocephala bamuru、Cladosporium cladosporioides、Oidiodendron citrinum。(3)对已鉴定的9个菌根真菌的生物学特性研究表明,不同菌株对温度的适应差别很大,其中菌株Y-005在20-25℃这个温度范围内生长最快,而其它供试菌株在25-30℃下生长速度最快;供试菌株对p H适应范围比较广,在不同的p H处理下,大部分菌株生长差异不明显,但是当p H=4时,供试菌株直径显著低于其它p H处理;另外,除了菌株Y-037、Y-012和Y-026在葡萄糖为碳源生长较快以外,其它供试菌株在以麦芽糖和半乳糖为碳源环境中生长最快,长势更好,但是各供试菌株以甘露醇和果糖为碳源均表现出生长缓慢;各供试菌株在酵母粉与蛋白胨作为有机氮源时生长速度较快;而不同菌根菌菌株在以硫酸铵、硝酸铵、硝酸钾为无机氮源时生长较为缓慢,特别是部分菌种株在硝酸铵条件下生长受到抑制。(4)将9个菌根菌菌株回接到蓝莓幼苗根部验证其对蓝莓幼苗生长的影响。结果发现,菌根菌与对照处理相比可以显著促进苗木的生长,尤其是在菌株Y-079、Y-037、Y-005、Y-026、Y-017和Y-012菌种处理下,与对照相比,蓝莓幼苗的苗高分别增长了85.93%、77.25%、76.31%、75.37%、68.62%和45.69%,地径分别增长了78.57%、69.29%、67.14%、50.71%、41.42%和51.42%;根长与表面积均超过对照的200%;平均直径分别提高了25.40%、41.27%、15.90%、26.98%、25.40%和33.33%;根尖数除了Y-026处理比对照的少,其余处理分别是对照1.80倍、2.38倍、2.39倍、1.93倍和1.53倍。综上所述,贵州蓝莓根系菌根菌资源丰富,多样性较高,物种组成差异性明显,且供试菌株大部分均能有效促进蓝莓生长。本论文为研究贵州蓝莓菌根菌的多样性、生物学特性及菌根菌在蓝莓上的应用和进一步研究奠定基础。
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