热疗对不同分化程度胃癌细胞增殖侵袭能力及Hsp70蛋白表达的影响

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目的:研究热疗对三种不同分化程度的胃癌细胞株增殖活性、侵袭能力及Hsp70蛋白表达的影响,初步探索不同分化程度的胃癌细胞对热疗的敏感性差异,为胃癌病人的个体化热疗提供理论依据,并初步探讨Hsp70蛋白在不同分化程度的胃癌细胞株中的表达情况。方法:将AGS(高分化)、SGC7901(中分化)、BGC-823(低分化)三种不同分化程度的胃癌细胞株在适宜的条件下体外培养至对数生长期,取该对数生长期细胞进行实验研究。将此三种不同分化程度的胃癌细胞株分为AGS热疗组、AGS常温组、SGC7901热疗组、SGC7901常温组、BGC-823热疗组、BGC-823常温组。热疗组细胞处理条件为43℃5%CO2热处理1小时后继续在37℃5%CO2条件下培养23小时;常温组细胞处理条件为37℃5%CO2连续培养24小时。热疗组和常温组细胞总的处理时间均为24小时。将进行了相应处理后的细胞分别进行如下实验:1.MTT实验,比较热疗组与常温组不同分化程度的胃癌细胞的增殖活性;2.Transwell细胞侵袭实验,检测热疗组与常温组各细胞侵袭的数目;3.Western-blot实验检测热疗组与常温组各细胞Hsp70蛋白的表达情况。结果:1.MTT实验结果显示:与常温组相比,热疗组不同分化程度的胃癌细胞OD值均明显降低,差异具有统计学意义(均P<0.05)。第24h,热疗对不同分化程度的胃癌细胞增殖活性的抑制率(%)分别为:AGS(16.17±3.16)、SGC7901(14.22±1.68)、BGC-823(12.69±0.83)。第24h热疗对各细胞增殖的抑制率:AGS>SGC7901>BGC-823(P<0.05);第48h热疗对各细胞增殖的抑制率(%)分别为:AGS(20.43±2.63)、SGC7901(15.58±1.55)、BGC-823(11.22±1.31)。第48h热疗对各细胞增殖的抑制率:AGS>SGC7901>BGC-823(P<0.05);第72h热疗对各细胞增殖的抑制率(%)分别为:AGS(19.73±1.85)、SGC7901(22.94±2.19)、BGC-823(20.43±1.94)。第72h热疗对各细胞增殖的抑制率:SGC7901>AGS(P<0.05),SGC7901>BGC-823(P>0.05),BGC-823>AGS(P>0.05)。2.Transwell细胞侵袭实验结果:热疗组和常温组不同分化程度胃癌细胞株侵袭细胞数目(个)分别为:AGS热疗组(31.80±1.79)、AGS常温组(84.60±4.16)、SGC7901热疗组(48.80±4.49)、SGC7901常温组(104.60±3.21)、BGC-823热疗组(76.00±7.38)、BGC-823常温组(124.60±1.14)。与常温组相比,热疗组各胃癌细胞侵袭细胞数目均减少,差异具有统计学意义(均P<0.05)。热疗对不同分化程度的胃癌细胞株侵袭能力的抑制率(%)分别为:AGS(62.38±2.08)、SGC7901(53.30±4.62)、BGC-823(39.01±5.78)。热疗对各细胞株侵袭能力的抑制率:AGS>SGC7901>BGC-823(P<0.05)。3.Western-blot实验结果:不同分化程度的胃癌细胞Hsp70蛋白表达的灰度值分别为:AGS热疗组(46.54±1.06)、AGS常温组(31.36±1.12)、SGC7901热疗组(53.69±0.89)、SGC7901常温组(34.34±0.97)、BGC-823热疗组(51.90±0.50)、BGC-823常温组(32.72±0.51)。与常温组相比,热疗组胃癌细胞Hsp70蛋白表达均明显上调(均P<0.05)。热疗组不同分化程度的胃癌细胞Hsp70蛋白表达量:SGC7901>BGC-823>AGS(P<0.05)。结论:1.热疗对胃癌AGS、SGC7901、BGC-823三种不同分化程度的细胞增殖活性、侵袭能力均有抑制作用,且细胞的分化程度越高,热疗的抑制作用越强。2.热疗能促进胃癌AGS、SGC7901、BGC-823三种不同分化程度的细胞Hsp70蛋白的表达上调。
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