麻疹是由麻疹病毒(Measles Virus，MV)通过飞沫传播引起的一种以出疹、发热为主要临床表现的急性呼吸道传染病。麻疹病毒属副粘病毒科麻疹病毒属，为单股负链RNA病毒，编码6种结构蛋白，从3端到5端分别次序为:核蛋白(N)、磷蛋白(P)、内膜蛋白(M)、血溶素蛋白(F)、血凝素蛋白(H)以及RNA聚合酶(L)，各基因的起始序列与终止序列都含有与mRNA的合成与加工有关系的共有序列。　　 近年的研究发现，在麻疹病毒的6个结构基因中，核蛋白(N)基因和血凝素(H)基因变异最大，N基因C末端450个核苷酸为该病毒最大变异区。在不同的麻疹野毒株之间最高变异程度可达12％，故N基因是国际上公认对麻疹毒株鉴定的重要指标。在麻疹病毒感染的急性期会产生强烈的体液免疫和细胞免疫，在所有结构蛋白中，核蛋白最早刺激机体产生有效的免疫反应。　　 目前麻疹检测方法主要有血清学检测和病原学检测，临床采用的检测方法一般直接利用麻疹全病毒作为抗原，存在分离困难和生物安全的问题。本研究试图通过表达重组蛋白获得具有一定抗原性的麻疹核蛋白，代替麻疹全抗原检测人群IgG抗体。为此，本试验选取麻疹病毒的核蛋白进行研究，通过成功表达麻疹核蛋白并检测其基本的抗原性，为开发快速、特异的麻疹血清抗体检测试剂奠定了基础。　　 本文以NCBI中麻疹病毒基因序列（GenBank: DQ211902.1）为基础，选取麻疹病毒核蛋白基因，通过PCR技术扩增核蛋白基因并连接到克隆载体。为更好适应大肠杆菌表达，将该目的片段分为两个小片段（A段40bp-873bp，B段739bp-1536bp）连接到原核表达载体pET28a(+)，成功构建了重组质粒pET-28a-MV-NA/NB，转化表达菌BL21(DE3)，重组大肠菌于37℃0.5mmol/LIPTG诱导表达4h后，该菌体裂解物经SDS-PAGE分析，在分子量约为30 kDa和29kDa处分别出现一条特异性蛋白条带，与预期的目的蛋白分子质量相符。Western blot检测结果显示麻疹核蛋白基因在大肠杆菌中表达成功，将重组蛋白按不同的量包被进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其抗原性，结果显示，兔免疫血清结果良好，而人免疫血清出现非特异性，P/N＜2.1，因而该重组蛋白不适合用于麻疹病毒人免疫血清学检测。　　 将麻疹核蛋白基因序列定向连接到真核表达时所用转载移体pVL1393上，鉴定后得到重组质粒pVL-MV-N，将病毒Bm-BacPAK6 DNA进行线性化处理后，与pVL-MV-N共转染家蚕BmN细胞。成功发生同源重组或转座后获得重组病毒BacPAK6-MV-N，用其感染家蚕5龄幼虫，收集幼蚕血淋巴，Western blot检测结果显示该重组蛋白在家蚕表达系统中得到成功表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)显示，兔免疫血清及人免疫血清结果良好，表明所表达蛋白有较好的特异性和抗原性，可用于麻疹病毒血清学检测。本研究为制备安全有效的麻疹基因工程疫苗、研制诊断试剂盒、研究病毒粒子的形成和病毒与细胞受体的相互关系等奠定基础。