IL-35在结直肠癌中的表达及意义

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[目的]  IL-35是最近发现的、Treg细胞特异性分泌的IL-12家族新成员。它由p35和EBi3两个亚基组成,是Treg细胞发挥其最大抑制效应所必不可少的细胞因子。其在体外具有促进Treg细胞扩增、诱导iTR35细胞产生、促进Th1细胞分化、抑制效应性T细胞活化和抑制Th17细胞产生等作用。研究表明,IL-35在肿瘤发生发展中有重要作用。本文以结直肠癌患者为研究对象,检测肿瘤组织和外周血IL-35的水平,同时检测外周血Treg细胞数量,从而探讨IL-35在结直肠癌诊断及治疗中的意义,为研究IL-35在肿瘤发生、发展中的作用奠定基础,为肿瘤早期诊断及免疫治疗提供重要的参考价值。  [方法]  收集2010年7月-2011年1月广东医学院附属医院胃肠外科经病理确诊的结直肠癌患者肿瘤组织50例(高分化14例、中分化14例、低分化10例及粘液腺癌12例)及对应癌旁(>5cm以外)组织50例,并取患者外周血分离血清及单个核细胞,以健康体检者50例作为对照组。采用免疫组织化学法检测50例结直肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织中IL-35亚基(EBi3和p35)的表达; ELISA法检测患者肿瘤组织和血清中IL-35表达水平;流式细胞术检测患者外周血Treg细胞数量,分析肿瘤患者与正常体检者外周血Treg细胞数量差异。  [结果]  1.免疫组织化学法检测发现50例结直肠癌肿瘤组织IL-35两个亚基EBi3及p35的表达强度均高于癌旁组织;且两亚基在肿瘤组织中的表达呈正相关(r=0.297,P<0.05);EBi3及p35的表达强度与肿瘤分化程度相关,两者在高、中分化/粘液腺癌组织中的表达强度明显低于低分化肿瘤组织(P<0.05);高、中分化及粘液腺癌组织中EBi3及p35的表达强度差异无统计学意义(P>0.05)。  2.ELISA检测结直肠癌患者肿瘤组织IL-35的表达水平(19.17±6.38pg/ml)高于癌旁组织(12.06±3.26pg/ml),差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤组织中IL-35表达水平与肿瘤分化程度相关,高、中分化腺癌及粘液腺癌组织中的表达水平明显低于低分化肿瘤组织(P<0.05);高、中分化及粘液腺癌组织中IL-35表达水平差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤组织中IL-35表达水平与肿瘤临床分期相关,Ⅲ/Ⅳ期(22.72±5.43pg/ml)明显高于Ⅰ/Ⅱ期(16.86±2.24pg/ml),差异具有统计学意义(P<0.05)。  3.术前患者外周血IL-35水平(79.90±9.87pg/ml)明显高于正常对照组(46.59±5.91 pg/ml),且术前(79.90±9.87pg/ml)明显高于术后(56.64±6.98pg/ml);外周血IL-35水平与肿瘤分化程度相关,高、中分化腺癌及粘液腺癌患者中的表达水平明显低于低分化肿瘤患者(P<0.01);与肿瘤临床分期相关,Ⅲ/Ⅳ期(87.36±6.28pg/ml)明显高于Ⅰ/Ⅱ期(74.50±2.84pg/ml),差异具有统计学意义(P<0.01)。  4.流式细胞术检测显示结直肠癌患者外周血Treg细胞水平明显高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05);且Treg细胞水平与肿瘤分化程度相关,高、中分化肿瘤组织中Treg水平明显低于低分化肿瘤组织(P<0.05),粘液腺癌组织中Treg水平明显低于低分化肿瘤组织(P<0.05);与肿瘤临床分期相关,Ⅲ/Ⅳ期结直肠癌患者外周血Treg细胞数量明显高于Ⅰ/Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。患者血清IL-35水平与外周血Treg细胞数量成正相关关系(r=0.382,P<0.01)。  5.患者肿瘤组织中EBi3、p35两个亚基及IL-35的表达均与外周血IL-35的水平成正相关关系(r值分别为0.284,0.306和0.376,P分别小于0.05,0.05和0.01)。  [结论]  本研究结果提示IL-35在肿瘤的发生、发展及转归中具有重要意义,有望成为一种新的肿瘤治疗靶点,但其在肿瘤发生、发展中的具体作用机制尚需进一步探讨。
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