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口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease, FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触传染性的动物疫病,主要感染猪、牛、羊等偶蹄动物,被国际动物卫生组织(OIE)列为必须通报的烈性传染病。FMDV是小RNA病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒属(Aphthovirus)的成员,有七个血清型,分别为O、A、C、Asia 1、SAT1、SAT2、SAT3,每个血清型又可产生很多基因亚型,血清型之间无交叉免疫保护作用。由于FMDV型多易变,免疫原性弱,造成疫苗的免疫持续期短,免疫保护效果差。因此,研制高效持久的疫苗成为FMD防制技术研究的一个重要内容。高水平中和抗体的产生需要有T细胞与B细胞的共同参与与协同作用, T细胞表位在抗原呈递细胞内与MHC分子结合并表达在细胞表面供T细胞识别结合,结合了抗原肽-MHC分子复合物的T细胞向B细胞提供协同刺激信号,活化并辅助B细胞分化为浆细胞,最终产生大量特异性中和抗体,因此,细胞免疫对于产生保护性免疫作用重大。基于以上认识,我们设计并原核表达一种T细胞免疫原,试图利用该T细胞免疫原为佐剂,提高现有灭活疫苗的免疫效果,使得现有灭活疫苗的免疫保护效果有一个明显的提高,也为蛋白亚单位疫苗的研制奠定基础。所设计的T细胞免疫原包含FMDV VP1,VP4, 3A和3D蛋白上多个T细胞表位与两个通用T细胞表位的T细胞免疫原,命名为TI;同时表达了O和Asia 1 FMDV两个型VP1蛋白的串联编码基因,表达产物命名为OA-VP1。将上述T细胞免疫原分别与OA-VP1和口蹄疫灭活疫苗按不同剂量组合免疫小鼠,于免疫后不同时间测定各组小鼠的体液与细胞免疫应答情况。采用微量中和试验检测小鼠O型和Asia 1型中和抗体,采用流式细胞检测技术和测定γ-干扰素的水平来分析不同免疫组小鼠细胞免疫的水平。结果显示,与灭活疫苗或OA-VP1单独免疫组相比,添加TI抗原后灭活疫苗(P<0.01)和OA-VP1免疫组(P<0.05)小鼠均能产生高水平的特异性中和抗体;且CD4+ T细胞数量显著增多,IFN-γ产生水平显著升高(P<0.01)。说明TI抗原具有很好的诱导特异性体液与细胞免疫应答的作用,是一种很好的免疫增效剂,可作为口蹄疫蛋白亚单位疫苗和灭活疫苗中的一种有效成份,以提高疫苗的免疫效果。