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目的构建并扩增携带红色荧光蛋白的抗菌肽PR-39的重组腺病毒载体（AdPR-39）及携带绿色荧光蛋白的骨形态发生蛋白-9（BMP-9）的重组腺病毒载体（AdBMP-9），AdPR-39与AdBMP-9共转染间充质干细胞C3H10T1/2，检测PR-39及BMP-9在C3H10T1/2细胞中的表达及生物活性。方法PCR扩增PR-39片段，亚克隆至pAdTrack-TO4质粒，构建重组穿梭质粒pAdTrack-TO4-PR-39，经双酶切及测序鉴定。pAdTrack-TO4-PR-39经PmeⅠ酶切，转化感受态AdEasier细胞，构建重组腺病毒质粒pAdPR-39。pAdPR-39经Pac I酶切后转染至HEK293获得重组腺病毒AdPR-39并进行扩增。扩增重组腺病毒AdBMP-9。将重组腺病毒AdPR-39及AdBMP-9感染间充质干细胞C3H10T1/2，通过荧光显微镜观察、RT-PCR及western blot鉴定目的蛋白的表达，同时检测PR-39的抗菌活性。结果pAdTrack-TO4-PR-39及pAdPR-39构建成功；AdPR-39包装成功，AdPR-39及AdBMP-9成功扩增。 AdPR-39及AdBMP-9成功感染C3H10T1/2细胞，且表达了PR-39及BMP-9蛋白。转染含PR-39的细胞的上清液能有效抑制金黄色葡萄球菌的生长，计算其抑菌率为96.1%。结论成功构建携带红色荧光蛋白的PR-39重组腺病毒载体。通过重组腺病毒载体介导的PR-39及BMP-9基因能在C3H10T1/2细胞中高效表达，同时在C3H10T1/2细胞中表达的PR-39具有较强的抗菌活性。