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目的：探究雌激素受体-a36(ER-a36)在雌激素受体-α(本课题中指ER-α66)阳性的乳腺癌继发性三苯氧胺耐药中的作用机制。方法与结果：本课题通过体外细胞培养的方法在ER-α66阳性的人乳腺癌细胞系MCF-7的基础上建立起了继发性三苯氧胺耐药的细胞株：MCF-7/TAM。进一步的研究发现：相比于MCF-7细胞,MCF-7/TAM细胞具有增强的体外增殖及迁移、侵袭的能力,且此种能力并不依赖于雌激素的存在。采用Western Blot和RT-qPCR的方法发现在MCF-7/TAM细胞中ER-a36和EGFR的表达水平均明显高于MCF-7细胞,而ER-α66的表达水平则明显低于MCF-7细胞,mRNA水平和蛋白水平保持一致。接下来,我们运用稳定转染的方法上调了MCF-7细胞中ER-a36的表达水平,并获得了两株过表达ER-a36的细胞：MCF-7/ER-α36-1和MCF-7/ER-α36-2.进一步的研究发现：MCF-7/ER-α36-1细胞对三苯氧胺的敏感性明显低于转染空载体的MCF-7/Ⅴ细胞,且具有比MCF-7/Ⅴ细胞更强的体外增殖及迁移、侵袭的能力,亦不依赖于雌激素的存在。采用Western Blot和RT-qPCR的方法发现MCF-7/ER-α36-1和MCF-7/ER-α36-2细胞中EGFR的表达水平均高于MCF-7/Ⅴ细胞,而ER-a66的表达水平均低于MCF-7/Ⅳ细胞,mRNA水平和蛋白水平保持一致。运用抗ER-α36的抗体拮抗MCF-7/ER-α36-1细胞中ER-a36的作用可以一定程度上抑制其增殖能力,并部分逆转EGFR和ER-a66表达水平的变化。稳定转染针对ER-a36的人工microRNA下调在MCF-7/TAM细胞中ER-a36的表达,可以抑制其体外增殖及迁移、侵袭的能力和裸鼠体内肿瘤形成能力。同时,下调MCF-7/TAM细胞中ER-a36的表达水平可以下调其EGFR的mRNA及蛋白表达水平,并上调ER-α66的mRNA水平。此外,运用抑制剂阻断MCF-7/ER-α36-1细胞中的EGFR/ERK信号通路可以部分恢复ER-a66的表达水平,提示EGFR/ERK-信号通路的激活参与了ER-α66表达水平的下调。结论：本课题首次提出ER-a36可能是引发继发性三苯氧胺耐药产生的乳腺癌细胞生长因子受体状态改变(EGFR表达水平的升高及ER-a66表达水平的降低)的驱动因素。首次提出ER-a36可能是继发性三苯氧胺耐药的乳腺癌的潜在治疗靶点。