变性高效液相色谱用于乙醇脱氢酶1B和乙醛脱氢酶2的基因分型

来源 :第一军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lr78
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景与目的 乙醇脱氢酶1B(alcohol dehydrogenase-1B)和乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase-2)是乙醇复杂的代谢通路上两个重要的酶。ADH1B基因位于4号染色体长臂2区2带,ALDH2基因位于12号染色体长臂2区4带,ADH1B*1基因在第3号外显子发生G143A变异,形成ADHlB*2,ALDH2*1基因在第12号外显子发生G1510A变异,形成ALDH2*2。两种变异更改了乙醇脱氢酶1B和乙醛脱氢酶2的酶代谢活性,并与亚洲人的酒精依赖性疾病密切相关。近来,人们还发现这两种变异与癌症,肝脏功能紊乱,冠心病,糖尿病并发症,多发性神经病也有一定的联系。因此,发展一种快速高效自动化的方法对两种基因型进行鉴定有助于预测个体酒精相关疾病的风险以及研究酶变异与酒精相关疾病的关系。 目前,检测这两种变异的主要方法有RFLP,PCR-CTPP,SSCP,APLP,MAMA等,这些方法各有其局限性,未在大多数实验室得到应用。变性高效液相色谱技术(DHPLC)是一种高通量,特异,敏感的检测突变和变异的平台,我们依据此平台建立了检测ADH1B和ALDH2的方法。 设计与方法 1.针对ADH1B和ALDH2基因以及G143A和G1510A变异位点设计PCR扩增体系。通过DNA测序获得ADH1B和ALDH2各种基因型样品。 2.利用经测序已知的基因型样品优化DHPLC分析杂合子的条件,将PCR产物与特定的已知纯合子质控PCR产物等体积混合,然后高温变性后缓慢复性。运
其他文献
通过对第25届、第26届、第27届3届奥运会田径决赛成绩和第7届、第8届、第9届全运会田径决赛成绩的整理、统计,用客观数据说明了世界田径运动在高水平上保持稳定,投掷项目水平
金属有机骨架材料(MOFs)是一种新型的多孔晶体材料,不仅具有大的孔径尺寸、比表面和孔隙率等特点,而且结构也具有新颖性、多样性以及热稳定性高等特点。MOFs材料的应用领域非
近年来,量子点(Quantum dots,QDs)因其半峰宽窄、亮度高、发光颜色随尺寸连续可调等优点在显示和照明领域具有极大的发展潜力。但在实际应用中还存在荧光强度低,发光性能不稳定等问题,而金属在特定频率光的照射下产生的电场可以增强附近荧光物质的发光性能,并可以通过对金属结构的设计实现对量子点荧光材料光学特性的有效调控。这些独特的性能使得具有表面等离激元特性的金属纳米阵列和荧光物质相结合,即等离
EMB(Electro-mechanical brake)是真正意义上的线控制动,完全摒弃了制动液,可实现与整车ABS、TCS、ESP、EBA等功能集成。提出了一种新的电动执行机构的方案,其相对电子机械制
在特定学科研究领域中,从科技文献中快速和正确地识别研究热点主题是了解该学科研究领域发展状况的重要手段,也是推动科技政策制定的重要环节。本文采用Relim算法从“动物遗
在区隔化族群制度下,苏联始终存在着多民族国家民族整合的难题。族群联邦制度规定的族群行政边界、差别化优惠政策强化的族属身份界限,使得民族边界意识在激进民主改革过程中,被
低影响开发措施为一类较为有效的城市雨洪管理方法,在海绵城市建设中应用较为广泛。为评估其水文效应,以深圳民治河流域为研究区域,构建SWMM城市雨洪模型,设计3种LID措施方案
拉曼成像技术为拉曼光谱技术的延伸,因其兼具拉曼光谱的分子指纹特性及图像分辨能力,被广泛应用于早期病变组织的诊断和监测。然而目前大多数拉曼成像技术采用基于激光点(线)
胃癌是一种常见的危害人类健康的疾病,其治疗方式主要依赖于手术切除,术后采用以化疗为主的辅助治疗。研究表明,胃癌血管新生在其发生、发展和转移过程中发挥重要作用。近年
目的:检测新疆维吾尔族宫颈癌中HPV16DNA、P53蛋白表达、MDM2基因表达及p53codon72多态性分布,探讨HPV16感染、P53蛋白表达、MDM2基因表达及p53多态性在宫颈癌致癌机制中的相互