自固化磷酸钙/纤维蛋白凝胶双相支架负载软骨细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究

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目的 1)研究自固化磷酸钙/纤维蛋白凝胶(CPC/FG)双相支架负载软骨细胞修复兔关节软骨缺损的可行性和有效性。2)探讨多孔自固化磷酸钙作为双相支架的一部分,在软骨修复过程中对软骨下骨的临时替代作用。3)研究多孔自固化磷酸钙直接嵌合于软骨下骨固定支架-软骨细胞复合体的有效性。 方法 1)将分离培养的第3代软骨细胞包埋到双相支架的纤维蛋白凝胶中,最终细胞浓度为2.5×10~7个/ml,体外培养1周,大体和光镜观察软骨细胞形态和载体的降解情况。2)移植软骨细胞-支架的复合体修复兔膝关节股骨髁的软骨缺损(软骨缺损直径约4mm,深约3.5mm,达软骨下骨质)。3)18只动物随机分成3组:A组中,左膝软骨缺损移植物为CPC/FG负载软骨细胞(实验组),右膝软骨缺损移植物为CPC/FG(对照组1);B组中,左膝软骨缺损移植物为FG负载软骨细胞(对照组2),右膝软骨缺损无移植物(空白对照组);C组中,双膝软骨缺损移植物均为CPC/FG负载软骨细胞(术后12周计算修复组织的胶原含量)。4)术后4、8、12周分批处死动物,大体、光镜、透射电镜观察软骨缺损的修复情况并进行组织学评分,计算术后12周修复软骨的胶原含量并与正常软骨比较。 结果 1)体外培养时,软骨细胞生长良好,保持典型的软骨细胞形态并分泌细胞外基质,纤维蛋白凝胶基本保持最初的形态。2)移植后软骨细胞生长良好,术后第12周,关节软骨缺损被透明软骨修复,与周围软骨及CPC结合紧密。而对照组仅纤维修复,组织学评分差异有显著性。术后第8周时,FG几乎完全降解。3)移植术后12周的修复软骨胶原含量为(43.25±0.57)%,正常的关节软骨胶原含量为(51.69±0.46)%,两者具有统计学差异。4)术后第12周,自固化磷酸钙少量降解,与软骨下骨紧密结合。安徽医:科大学硕士学位论文结论1)自固化磷酸钙/纤维蛋白凝胶双相支架负载软骨细胞能以透明软骨的形式修复兔关节软骨缺损。2)多孔的自固化磷酸钙在软骨修复过程中能充当软骨下骨的临时替代物。3)多孔自固化磷酸钙直接嵌合于软骨下骨能有效固定支架-软骨细胞复合体。
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