云南蜂胶对舌癌细胞影响的体外实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ytcjy
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[目的]本研究以云南蜂胶醇提物体外作用于人舌鳞癌细胞,研究蜂胶对细胞超微结构及细胞增殖力的影响,初步探讨蜂胶促进人舌鳞癌细胞凋亡的可能机制,以期对蜂胶抗舌癌作用提供实验依据。[方法]采用含有浓度为25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、400ug/ml蜂胶醇提物的培养基干预培养人舌鳞癌细胞和正常人口腔粘膜成纤维细胞,通过MTT法检测蜂胶对人舌鳞癌细胞和正常人口腔粘膜成纤维细胞的影响;采用倒置显微镜和透射电子显微镜观察不同浓度的蜂胶对人舌鳞癌细胞作用不同时间点细胞数量、形态和结构的变化;免疫组化P-V两步法检测人舌鳞癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2, Bax, Caspase-3在用药前后的表达变化。[结果]体外实验研究结果显示,蜂胶对人舌鳞癌细胞的生长具有明显的抑制作用,总体上其抑制作用具有时间和浓度依赖性;蜂胶对正常人口腔黏膜成纤维细胞有一定的抑制作用,同样具有时间和浓度依赖性,但相同时间、相同浓度的蜂胶对两种细胞的作用存在显著性差异(p<0.01);倒置显微镜观察到随蜂胶浓度的升高,作用时间的延长,舌癌细胞贴壁率越低,细胞形态改变越明显;透射电镜观察舌鳞癌细胞凋亡的形态改变,胞浆内出现空泡,线粒体肿大变圆,细胞微绒毛脱失,细胞核皱缩、破碎,染色质斑块状边缘聚集,线粒体嵴溶解形成多泡体及凋亡小体;对细胞凋亡相关蛋白的研究结果显示,用药前后细胞凋亡相关蛋白表达有显著变化,用药后凋亡相关蛋白Bc1-2表达减弱,Bax, Caspase-3则表达增强。[结论]蜂胶在体外能有效地抑制人舌鳞癌细胞的增殖;蜂胶对人舌鳞癌细胞具有细胞毒性,可致人舌鳞癌细胞细胞核固缩、碎裂,核染色质斑块状聚集,线粒体肿大变圆及形成凋亡小体;蜂胶诱导人舌鳞癌细胞凋亡,可能与下调Bc1-2,上调Bax、 Caspase-3等凋亡相关蛋白表达有关。
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