WISP3对软骨细胞增殖分化的作用

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目的:研究重组人WISP3蛋白(rhWISP3)对人永生化软骨细胞T/C-28a2增殖和分化的作用,初步探讨是否通过IGF-1信号通路发生作用。方法:分别应用不同浓度rhWISP3干预人永生化软骨细胞T/C-28a2,用[~3H]-脱氧胸腺嘧啶([~3H]-TdR)摄入法测定细胞的增殖活性。用rhWISP3与重组人IGF-1蛋白(rh IGF-1)同时干预T/C-28a2细胞,用[~3H]-TdR摄入法测定细胞的增殖活性。用免疫印记法检测不同浓度WISP3蛋白干预的T/C-28a2细胞Ⅱ型胶原的表达变化。用IGF-1信号通路阻断剂JB1干预细胞后,用免疫印记法检测WISP3蛋白对T/C-28a2细胞Ⅱ型胶原的表达的影响。结果:[~3H]-TdR摄入法测定细胞的增殖活性,WISP3蛋白对软骨细胞增殖活性无明显影响。IGF-1蛋白明显促进T/C-28a2细胞增殖,WISP3对IGF-1促T/C-28a2细胞增殖的作用无影响。免疫印记显示WISP3蛋白明显促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达,呈浓度依赖型。人IGF-1蛋白干预T/C-28a2细胞能明显促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达。IGF-1信号通路阻断剂JB1能阻断IGF-1促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达的作用,不能阻断WISP3促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达的作用。结论:WISP3蛋白对T/C-28a2细胞增殖作用无明显影响,呈浓度依赖型促进Ⅱ型胶原的表达,这种促表达的作用可能是通过独立于IGF-1信号通路而产生。
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目的:WISP3通过调节Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的合成维持软骨稳定性。晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT-PA)相关型WISP3突变能阻断此功能而引起软骨丢失。本实验探讨了W
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