脂肪来源干细胞抗光老化的实验研究

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研究背景:皮肤老化是内外在因素共同作用的结果,其中由长期暴露在紫外线照射下而导致的光老化占主要因素,最终使皮肤组织结构完整性降低,正常生理功能被破坏,严重影响“美观”和人们的健康生活。脂肪来源干细胞(Adipose derived stem/stromal cells,ADSCs)是成人祖细胞的其中一种来源,它是从脂肪组织中分离提取出来的,跟骨髓间充质干细胞和外周血干细胞具有同等多向分化潜能的基质细胞,因为相对丰富、易于分离、对机体创伤小、自我更新能力强和低免疫原性而成为非常具有前景的干细胞来源。目的:旨在观察评估ADSCs裸鼠皮下注射后治疗皮肤光老化的有效性和可能性。方法:1.从健康成年女性的脂肪组织中分离提取ADSCs。2.18只SPF级雌性裸鼠随机分为对照组(注射PBS)、UVB模型组(UVB照射8周后注射PBS)、ADSCs组(UVB照射8周后皮下分点注射含1×10~6个ADSCs的PBS),每组6只。继续喂养4周后,通过拍照进行裸鼠背部皱纹评分以对比裸鼠的大体外观变化,切取裸鼠背部注射部位的皮肤进行包埋切片,通过HE染色观察裸鼠皮肤结构和真皮层厚度,Masson染色观察胶原纤维的排列情况和含量,通过CD31免疫组化观察皮肤血管的新生情况,间苯二酚碱性品红染色观察弹力纤维的排列。结果:1.成功从脂肪组织中提取出ADSCs,贴壁生长,形似成纤维细胞样;经油红O、茜素红、碱性磷酸酶染色鉴定结果阳性,表明分离出的ADSCs细胞具有成脂成骨分化能力;流式细胞术结果显示ADSCs高表达CD29、CD44、CD90、CD105,低表达CD34、CD144、HLA-DR,符合ADSCs表面标记物的特征。2.宏观表现上,经过8周的UVB紫外灯照射后,裸鼠背部出现了明显的深皱纹,纹理粗糙,皮肤增厚甚至呈现皮革样外观,弹性差,伴色素沉着,脱屑等,与正常对照组相比皱纹评分明显增加;在ADSCs注射4周后,裸鼠皮肤外观明显改善,弹性增加,质地柔软,皱纹减少,无色素沉着,无脱屑,皱纹评分较UVB组明显下降。3.组织病理切片中,对比UVB模型组,ADSCs注射治疗后HE染色结果显示真皮厚度明显增加,Masson染色显示胶原含量显著上升,CD31免疫组化染色见皮肤血管新生明显增多,间苯二酚碱性品红染色见弹力纤维排列整齐有序。结论:脂肪来源干细胞(ADSCs)皮下注射有助于恢复光老化皮肤的组织结构完整性,促进皮肤胶原合成,使弹力纤维重新排列整齐,增加真皮层厚度和新生血管数量,改善皮肤光老化的迹象,促进皮肤年轻化。
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