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由病原菌Avenae avenae subsp.avenae引起的水稻细菌性褐条病随着近年来暴风雨等恶劣天气的影响,其发病趋势越来越严重。 本论文通过对病原菌基因组测序、生物信息学分析,得到12个六型分泌系统vgrG基因。利用分子进化遗传分析软件MEGA v.5.0.3对12个vgrG基因序列分析,得到8个核心vgrG基因(vgrG1-8)。分别利用CFSSP、GOR4两种方法预测核心vgrG蛋白二级结构,最终选出2个vgrG基因(vgrG1-2)进行功能研究。 首先,依据同源交换原理,通过构建重组质粒,转化、筛选表达,实现特定基因的定点突变,构建2个突变体菌株△vgrG1、△vgrG2并对其理化特性和致病性研究。结果表明,vgrG1/vgrG2基因的突变导致细菌的致病性丧失,且抗逆性减弱。其次,利用RT-PCR技术研究不同培养条件下突变体菌株中六型分泌系统基因的表达变化,结果显示:vgrG1-2基因的突变直接导致其他六型分泌系统基因表达异常,且在含有卡那霉素的情况下,vgrG1突变更易于抑制其他基因的表达,而vgrG2则更倾向于促进其他基因的表达。