研究背景结直肠癌是世界上最常见的癌症之一,随着我国生活习惯和饮食结构的改变以及人口老龄化进程的加快,在我国结直肠癌发病率近几年呈上升趋势。提高结直肠癌的早期诊断率对于及时发现、治疗及改善患者预后非常重要,然而结直肠癌的早期诊断仍然有许多困难。血清肿瘤标志物检测是常用的结直肠癌早期筛查方法之一,然而其敏感度及特异度却不尽如人意。近年来,外周血cf-DNA作为一种新的肿瘤标志物在结直肠癌的早期诊断方面起到重要作用。本研究通过提取患者外周血cf-DNA及肿瘤组织DNA,进行外周血cf-DNA浓度测定、高通量外显子测序及生物信息学分析,试图找出对结直肠癌早期诊断有意义的相关位点；并通过免疫组化染色方法,初步了解PTEN蛋白、NOK蛋白在结直肠癌及正常结肠黏膜组织中的表达情况,了解其表达与肿瘤分化程度是否存在相关性可能。研究方法1、选取2015.9-2016.5期间于北京协和医院初诊为溃疡性结肠炎、结直肠腺瘤、早癌、进展期癌的患者,通过肠镜或手术方式收集腺瘤及肿瘤原发灶标本和癌旁正常组织(同一例患者的癌组织与癌旁组织成对采集),同时收集患者外周血标本。通过DNA提取、片段化、扩增、捕获等步骤,检测外周血cf-DNA浓度,并对样本进行高通量外显子测序。2、选取2015.1-2016.6于北京协和医院接受手术治疗的结肠癌患者肿瘤蜡块,取距癌肿边缘8cm以上邻近无增生的正常结肠黏膜作对正常组织行自身对照,经HE染色再次确认原始组织学诊断后行PTEN及NOK免疫组化检测。研究结果1、共获得来自6个患者的外周血、原发灶及癌旁正常组织共19份样本,经外周血cf-DNA浓度测定,炎症性肠病及结直肠癌病人外周血cf-DNA浓度均较结直肠腺瘤病人为高。2、初步结果显示PTEN在正常结肠黏膜组织中的表达高于结肠癌组织,而NOK在肿瘤组织中表达则高于正常结肠黏膜组织,且NOK在中、高分化结肠癌组织中趋于胞膜分布。结论外周血cf-DNA浓度检测结合高通量外显子测序可能用于结直肠癌的辅助诊断,但还需要扩大样本量及进一步实验研究。PTEN的缺失、突变可能与结肠癌发生相关,NOK可能在结肠癌的发生、发展过程中有一定作用,值得后续进一步实验研究其分子机理及临床应用前景。