【摘 要】
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目的:以转基因玉米为转基因植物中的代表,以苏云金杆菌Bt蛋白中的Cry1Ac为模式蛋白,建立外源蛋白的原核表达系统,并对表达蛋白进行生物信息学、体外实验研究和转基因玉米的动
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目的:以转基因玉米为转基因植物中的代表,以苏云金杆菌Bt蛋白中的Cry1Ac为模式蛋白,建立外源蛋白的原核表达系统,并对表达蛋白进行生物信息学、体外实验研究和转基因玉米的动物实验研究,为我国建立转基因食品的安全评价体系提供技术平台和科学依据.结论:1.构建了能正确表达Cry1Ac蛋白的pET-28(b)大肠杆菌表达系统,得到了纯度达90%以上的Cry1Ac的纯化蛋白,并制备了相应的多克隆抗体.2.经等同性试验鉴定,上述大肠杆菌表达的Cry1Ac蛋白与转基因玉米中表达的Cry1Ac蛋白具有相同的免疫反应性及相似的生物学活性,可以用此蛋白进行安全性评价试验.3.生物信息学的初步分析未发现Cry1Ac蛋白具有潜在毒性、致敏性.4.经体外稳定性试验研究,转基因玉米中的外来蛋白Cry1Ac对热敏感,在热加工中可以迅速分解,在生理条件(pH<2)胃蛋白酶作用下很快分解.5.本研究未发现食用转Cry1Ac基因玉米的SD大鼠与食用传统玉米的SD大鼠在所确定的实验指标上具有差异.
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