迟发性性腺功能减退症(late-onset hypogonadism, LOH)最近被定义为中老年男性低睾酮的一种综合症。男性衰老会伴随着血清睾酮水平的下降,主要引起的临床表现为性功能障碍、机体肌肉含量下降、骨矿物质减少和其他生理参数下降等。睾酮主要产生于睾丸Leydig细胞,中老年男性Leydig细胞数量减少和功能减退导致血清睾酮水平下降是引起LOH发病的核心机制。细胞在代谢的过程中会伴随着大量ROS产生,包括H202、羟基自由基和超氧阴离子等。在Leydig细胞内ROS的积累会抑制睾酮合成酶基因的表达导致睾酮合成下降。Peroxiredoxin 2 (Prdx 2)是过氧化物酶家族的成员之一,具有将过氧化氢(H202)还原成水的能力,以清除细胞内多余的活性氧分子。本实验用不同低浓度的H2O2刺激大鼠睾丸Leydig细胞,研究低水平的H2O2对Leydig细胞凋亡和睾酮分泌的影响；验证Prdx 2在Leydig细胞中表达；探索在H202不同剂量和不同时间刺激下,Prdx 2在Leydig细胞中表达的变化。本课题研究中用低浓度H202诱导大鼠睾丸Leydig细胞氧化应激,检测细胞内MDA水平,采用流式细胞术检测细胞凋亡的变化,应用化学发光法检测细胞睾酮分泌的变化；再通过Western blot和实时荧光定量PCR方法检测Prdx 2在Leydig细胞中mRNA水平和蛋白水平表达的变化。研究结果表明细胞内MDA水平显著增加,随着H202浓度的升高和时间的延长,细胞凋亡率上升、存活率和睾酮分泌下降。用RT-PCR和Western blot两种技术分别从RNA水平和蛋白水平验证Prdx 2在Leydig细胞中表达。我们进一步研究低浓度H202作用下Prdx2在大鼠睾丸Leydig细胞中表达的变化,发现随着H202浓度的增加,Prdx 2蛋白表达呈现下降的趋势。同时研究发现,随着H202对细胞孵育时间的延长,Prdx2蛋白表达也呈显著下降。而Prdx 2在mRNA水平上并无显著变化。由此我们得出结论,低浓度范围内的H202会导致大鼠睾丸Leydig细胞凋亡、细胞存活率和睾酮分泌下降。这些可能是引起LOH发生的主要原因之一。低浓度H202作用下,Prdx 2蛋白在Leydig细胞表达呈现下降的趋势,可能是由于H202的作用下,Prdx 2分子结构的发生了转变。得出Prdx 2具有清除H202的能力,减少H202在细胞内积累,进而保护了由氧化应激诱导的Leydig细胞凋亡和睾酮合成的下降,为LOH的治疗和预防提供了理论价值。