负载BDNF的GelMA-OALG水凝胶生物支架用于修复脊髓损伤的研究

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【目的】:制备甲基丙烯酰明胶-氧化海藻酸钠(Gel MA-OALG)水凝胶生物支架,并鉴定相关物理性能;探讨Gel MA-OALG水凝胶搭载神经干细胞(NSCs)的生物相容性及负载脑源性神经营养因子(BDNF)对NSCs分化促进作用;探讨该支架对大鼠脊髓损伤(SCI)神经再生修复的作用。【方法】:通过紫外光交联技术制备出具有柔软、高含水性、生物相容性的Gel MA-OALG水凝胶生物支架。从胎鼠提取的NSCs,通过将其与支架共培养,检测Gel MA-OALG水凝胶支架的生物相容性,并研究BDNF对NSCs的神经营养作用及促进NSCs分化能力。建立大鼠SCI全切模型,用随机数字表法分为SCI组、SCI/Gel MA-OALG/NSCs组和SCI/Gel MA-OALG-BDNF/NSCs组,通过BBB运动评分量表进行大鼠术后下肢运动功能的评价。在术后8周取脊髓组织切片染色观察神经修复的情况。【结果】:体外试验显示NSCs在Gel MA-OALG凝胶生物支架上生长情况良好,BDNF联合Gel MA-OALG水凝胶支架组可以显著促进细胞的分化,相对于其余二组差异有显著统计学意义(P<0.05)。动物试验显示,损伤后所有组的大鼠BBB评分均降至0分,并随着术后恢复时间的延长渐增加,SCI组和SCI/Gel MA-OALG/NSCs组BBB评分低于SCI/Gel MA-OALG-BDNF/NSCs组(P<0.05)。8周后使用神经元特异性标志物Neu N免疫荧光染色,显示SCI组大鼠脊髓损伤中心神经元表达降低,SCI/Gel MA-OALG/NSCs组和SCI/Gel MA-OALG-BDNF/NSCs组神经元较前者增高。其中SCI/Gel MA-OALG-BDNF/NSCs组神经元数量表达最多(P<0.05);差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】:负载BDNF的Gel MA-OALG水凝胶生物支架治疗SCI具有神经保护和神经营养作用,促进脊髓神经再生修复,是一种很有前途的治疗策略。
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