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目的: 研究下丘脑外侧区—室旁核(LHA—PVN)nesfatin-1神经和功能通路构成,探讨nesfatin-1在该通路对胃传入信息和胃动力调控及潜在机制。 方法: 采用荧光金( FG)逆行追踪结合荧光免疫组织化学染色,观察 LHA—PVN nesfatin-1神经通路的构成;采用细胞外放电记录,观察nesfatin-1对PVN内GD神经元放电活动的影响;通过电刺激LHA及PVN微量注射nesfatin-1抗体,观察LHA—PVN通路nesfatin-1对GD神经元放电活动的影响;采用在体胃运动记录,观察PVN nesfatin-1对胃运动和胃排空的影响;电刺激LHA及PVN微量注射nesfatin-1抗体,观察LHA—PVN通路nesfatin-1对胃动力调控及潜在机制。 结果: (1)荧光金逆行追踪结合荧光免疫组化实验显示,PVN注射荧光金7天后,在LHA发现有荧光金标记的神经元,结合nesfatin-1荧光免疫组化染色,镜下可见LHA内部分标记荧光金的神经元胞体内有nesfatin-1免疫阳性活性物的表达。提示, LHA部分nesfatin-1神经元可发出纤维投射至PVN。 (2)PVN微量注射Nesfatin-1,GD-E神经元放电频率显著降低(P<0.05),但GD-I神经元放电频率显著增加(P<0.05);若预先 PVN注射缩宫素受体拮抗剂H4928,可显著减弱nesfatin-1对GD神经元的效应(p<0.05)。提示,nesfatin-1在下丘脑 PVN可参与胃牵张传入信息调控,且该效应可能与缩宫素受体信号通路有关。 (3)电刺激LHA,PVN内GD-E和GD-I神经元放电频率显著增加(P<0.05);若PVN预先注射抗NUCB2/nesfatin-1抗体再电刺激LHA,此时因电刺激诱导的促GD-E神经元的放电活动进一步加强(P<0.05),而 GD-I神经元放电活动则减弱(P<0.05)。提示,LHA—PVN nesfatin-1通路可能参与胃传入信息调控。 (4)PVN微量注射nesfatin-1,大鼠胃运动显著减弱(P<0.05),胃排空率显著降低(P<0.05);若预先PVN注射H4928,可显著降低nesfatin-1抑制胃运动和胃排空效应(P<0.05)。提示,nefatin-1在下丘脑PVN可参与胃动力调控,该效应也可能与缩宫素受体通路有关。 (5)电刺激 LHA,大鼠胃运动指数显著增加(P<0.05),若 PVN预先注射抗NUCB2/nesfatin-1抗体再电刺激LHA,此时因电刺激诱导的促胃动力效应进一步增强(P<0.05)。提示,LHA—PVN nesfatin-1通路可能参与传出胃动力调控。 结论: LHA—PVN间存在nesfatin-1神经和功能通路;该通路参与胃传入信息和传出胃动力调控;缩宫素受体信号可能参与该过程的调控。