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真菌毒素是由曲霉属、青霉属、镰刀菌属等真菌产生的次级代谢产物,广泛污染植物源性农产品。目前已被发现鉴定的真菌毒素多达300余种,其中30多种真菌毒素对人畜生命健康与环境危害性极大。研究发现,一些真菌可同时产生多种真菌毒素,同一农产品容易被不同真菌产生的多种真菌毒素同时污染,导致农产品真菌毒素混合污染严重。毒理学实验表明,多种真菌毒素混合污染的危害具有显著的协同作用或加性效应。建立农产品真菌毒素混合污染快速检测技术,对于农产品真菌毒素混合污染政府监管和保障消费安全具有重要理论意义和应用价值。现有真菌毒素混合污染检测技术主要是针对同一毒素,农产品真菌毒素等化学污染物多组分快速检测技术研究主要是基于胶体金免疫层析检测技术,可实现定性(或半定量)检测,但其难以实现真菌毒素混合污染同步定量快速检测。基于免疫层析法原理,本论文研究建立基于高荧光量子产率、高化学/胶体稳定性的量子点纳米球的真菌毒素混合污染同步定量快速检测技术,克服量子点试纸条检测技术稳定性差的难题,实现3种真菌毒素混合污染同步定量快速检测,从而提高真菌毒素混合污染同步定量的检测通量和灵敏度,为农产品真菌毒素混合污染同步检测提供新方法。本文主要研究内容和创新点如下:1.研究建立了黄曲霉毒素总量量子点纳米球免疫层析检测技术,实现了大米和花生实际样品的同步定量快速检测。研究建立了量子点纳米球与黄曲霉毒素高特异性单克隆抗体偶联技术,优化了偶联pH值、抗体标记量。通过优化量子点纳米球探针用量、检测时间、甲醇浓度等条件,建立了黄曲霉毒素总量量子点纳米球免疫层析快速检测技术,制备出黄曲霉毒素量子点纳米微球免疫层析试纸条。该方法对大米和花生的检测限分别为1.4、2.8 pg/mL,线性范围分别为2250、2125 pg/mL。大米和花生基质的加标回收率分别为86.3%118.0%、91.3%106.3%,相对标准偏差小于11.8%。该方法的准确度和精密度良好,批内批间差异低于11.2%。该方法检测耗时短,10分钟即可获得检测结果。应用该方法检测10份实际市售花生和大米样品中黄曲霉毒素总量,结果与HPLC检测结果完全相符。2.研究建立了农产品黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮毒素、伏马毒素B1的多组分量子点纳米球免疫层析同步检测技术。以量子点纳米球为荧光标记材料,分别制备3种真菌毒素的抗体荧光探针,制备出3条检测线的免疫层析试纸条。通过优化免疫试剂用量、检测时间等因素,建立了高灵敏、适用于现场即时检测的真菌毒素同步检测量子点纳米球免疫层析检测技术。在甲醇溶液、玉米基质、花生基质中,该方法对黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮毒素、伏马毒素B1的检测限分别为2.4、2.5、4.5,20.4、28.1、36.3,2.5、3.2、4.0 ng/kg,检测线性范围均可达两个数量级。添加回收实验结果表明,该方法对玉米和花生的加标回收率在86.3103.7%之间,相对标准偏差小于8.8%。该方法特异性好,灵敏度高,结果准确度和精确度良好,可在15 min内进行快速定量检测。