生物大分子相互作用的共振散射光谱法研究

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ntieing
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
共振光散射及其相关技术是二十世纪90年代发展起来的一种新兴的分析技术,因其灵敏度高、操作简便和较好的选择性而引起了人们的广泛兴趣和关注。特别是它在研究生物大分子识别、组装和聚集时出现灵敏而丰富的信号,已成为研究生物大分子的一种十分有用的手段。目前主要集中在生物大分子分析方面的应用,对于研究其相互作用机理方面却涉及较少。生物大分子之间以及生物大分子与其它分子间相互作用涉及诸如金属离子-配体、酸-碱、分子间(氢键、范德华力和疏水作用等)、分子缔合(如胶束)、酶-配体以及生物大分子-药物等众多作用体系,几乎是生命体系中所有化学过程引发的基础。因此,系统地将共振散射光谱应用于生物大分子相互作用在理论和应用方面有着重要的实际意义。   本论文主要以共振光散射光谱(RLS)、二维共振散射相关谱(2D-RLS),并结合荧光光谱以及紫外吸收光谱来研究生物大分子之间及其与其它分子(小分子及聚合高分子)间的相互作用,拓展和深化了共振光散射光谱的应用领域,同时也得到了一些有意义的结果。主要研究内容共分六个部分。   第一部分用荧光光谱及RLS光谱研究了牛血清蛋白(BSA)与山梨酸钾(PSA)在溶液中的相互作用,探讨了PSA对BSA荧光和RLS光谱猝灭的机理,并利用荧光及RLS数据测定了该反应的表观结合常数及结合位点数。结果表明,PSA与BSA之间主要是静电作用以及疏水作用,并在288K和293K时近似形成一个结合点。最后,基于Forster非辐射能量转移理论计算了PSA与BSA之间的结合距离。   第二部分来研究了淀粉与壳聚糖分子间缔合作用机理,并探讨了复合物稀溶液的性质。研究结果表明,淀粉与壳聚糖可形成分子间复合物,并在浓度0.1~1.0 g/L内复合物并呈均匀的溶胶状态。然而,复合物的溶液性质在外界条件刺激如改变溶液pH时会发生急剧的变化,显示了复合物在溶液中的聚集及相分离行为。特别地,少量Fe3+离子的加入不仅可增强复合物的RLS强度,而且还能诱导复合物在溶液中形成胶束。基于RLS数据计算了复合物在不同温度下的临界胶束浓度以及胶束形成过程中的的热力学参数。   第三部分研究了肝素与牛血清白蛋白(BSA)的结合作用。结果表明肝素与BSA之间存在着强烈的相互作用,导致体系RLS强度增加,并使BSA的构象发生改变。同时,它们之间的结合方式随体系pH和温度而改变。基于此现象,建立了一种基于共振光散射测定大分子物质相互作用的新方法,并计算了不同结合情况下的结合位点数及相互作用过程中的热力学参数。热力学分析表明它们之间的相互作用力主要有电子作用力以及疏水力,其中电子作用力是最主要的。   第四部分研究了聚乙二醇(PEG)与牛血清白蛋白(BSA)在生理pH溶液中的结合作用,基于RLS数据,测定了PEG与BSA之间的结合常数,并在相同条件下与荧光光谱方法进行了对比。机理研究表明,高度运动的线性PEG分子与球型BSA分子之间作用力包括氢键以及疏水力作用。此外,铜离子的加入可显著地促进PEG和BSA之间的相互作用,不仅参与复合物的形成而导致体系RLS强度的迅速增加,而且也使得BSA的荧光出现猝灭并影响氨基酸侧链微环境的变化。   第五部分研究了亲水性羧甲基纤维素(CMC)与疏水性聚乳酸(PLA)在混合溶液中的结合行为。RLS及荧光光谱的结果表明两者之间存在着明显的相互作用。PLA羰基氧原子和CMC分子上羟基通过分子间氢键而生成稳定的CMC/PLA复合物。考察了温度及质量比率对相互作用的应用,随着CMC质量比率的增加,体系RLS强度出现了两个明显的拐点,分别对应于复合物的形成和聚集。基于RLS数据,分析了聚合物的聚集平衡以及热稳定性,并计算了反应过程中平均结合位点数。   第六部分基于RLS研究了牛血清白蛋白(BSA)与淀粉和聚丙烯酸(PAA)三者之间的结合作用,并考察了PAA浓度及质量比率(MR=MBSA/MStarch)对其相互作用的影响。研究结果表明,淀粉和BSA可通过各自与PAA之间的氢键作用而形成一种新型的三元复合物,但是结合过程优先发生在PAA和BSA之间。同时,BSA与淀粉之间存在着与PAA分子结合的竞争。此外,它们之间的相互作用还与BSA溶液浓度的高低有着密切的关系,低浓度的BSA有利于复合物的生成,而高浓度的BSA则引起复合物的分解。荧光光谱和紫外吸收光谱结果进一步证实了PAA与BSA以及淀粉三者之间可形成一种交联三元复合物。
其他文献
造纸工业是一个与国民经济息息相关的行业,同时也是一个能源及化工原料消耗高、用水量大、对环境污染严重的行业。随着我国造纸工业的迅速发展,企业生产能力急剧提高,排出的大气
研究了溶剂法制备非晶颗粒态羧甲基玉米淀粉的过程及羧甲基淀粉的性质,采用了三种不同的方法制备羧甲基淀粉,得到不同取代度的羧甲基淀粉产品首先对反应条件进行了分析,最后对非
作为单位内部管理中重要组成部分,加大财务管理的控制力度可以保证公司资金正常流转,实现公司良好运营.本文结合单位在这方面的管理现状,从财务预算、资金控制、成本控制、管
本刊讯7月15日,国家新闻出版广电总局发布了《2014年新闻出版产业分析报告》(以下简称《报告》)。报告称,2014年全国出版、印刷和发行服务实现营业收入19967.1亿元,同比增长9
随着我国基础设施建设和房地产业的快速发展,对混凝土和建筑用砂石料的需求与日俱增,消费量巨大.一般情况下,混凝土用砂石料约占混凝土质量的6/7,混凝土骨料消耗量近100亿吨.
多作用内曲线径向柱塞泵具有低转速、大排量的特点,在风电领域和变频等领域的应用前景非常好。本文以应用广泛的等加速定子曲线为研究对象,主要围绕幅角变化对定子曲线性能的影响、定子曲线幅角分配设计方法、幅角分配对流量脉动的影响等问题展开分析和研究,为开发设计多作用内曲线径向柱塞泵提供理论支撑。首先,介绍了液压技术在风电领域和变频领域的应用优势,指出了低速大排量液压泵是将该优势化为直接生产力的纽带,并提出采
电机泵作为液压传动领域新型的动力源装置,其具有整体结构紧凑、集成度高以及绿色环保等一系列优点。双斜盘柱塞式电机泵是一种创新型结构设计的电机泵,其内部存在复杂的电磁及机械的强耦合关系,这种耦合作用会激发电机泵内部机构的高频共振,影响电机泵的工作性能及使用寿命,因此双斜盘柱塞式电机泵的动力学分析具有十分重大的研究意义。本文以课题组研制的双斜盘柱塞式电机泵为研究对象,对电机泵内部旋转缸体轴振动模态、转子
经济社会的发展,中国经济环境发生巨大改变,特别是知识经济与电子化经济的高速发展,为财务会计工作提供新的调整与挑战.加上市场经济发展模式的转变,企业内部管理工作效用更
本文测定了长达130 kb的来自7种蛇(8个个体)的完整的线粒体基因组全序列,均来自我国广泛分布的经济价值较高的主要毒蛇种类,包括:①眼镜蛇科眼镜蛇亚科:环蛇属的金环蛇和银环蛇、眼
人才是推动生产力向前发展的决定性因素,但是,人才又不是万能的,它的适应性是多种多样的,不同的人需要放在不同的岗位,才能人尽其才,实现最大效用,这就叫胜任力。技术型复合人才是我