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目的:
探讨不同小剂量异丙酚对内毒素孵育兔的离体肺动脉环和胸主动脉环张力的影响及可能机制,为感染性休克患者麻醉用药提供理论依据。
材料和方法
一、材料
(一)动物选择及分组选择健康成年雄性大耳兔5只,体重2.5~2.8kg,由中国医科大学盛京医院动物实验中心提供。用异氟醚麻醉后,制备离体肺动脉环和主动脉环,采取组间配对、组内随机的方法,分为4组(n=5):肺动脉环(P);内毒素孵育肺动脉环(PL);主动脉环(A);内毒素孵育主动脉环(AL)。各组血管环用50μmol/L和100μmol/L异丙酚处理。
(二)主要试剂大肠杆菌内毒素E.coli脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,美国Sigma公司,型号L2880,用生理盐水稀释成浓度为10%的溶液,-20℃保存);乳酸林格氏液(中国大冢制药有限公司,批号:7F704);生理盐水(天津百特医疗用品有限公司,批号:C0701121A);4℃改良KRB(Krebs-Ringer bicarbonate)液:RPMI-1640培养液(南京建成生物工程研究所);苯肾上腺素(PE,深圳沃兰德有限公司);异氟醚;氯化乙酰胆碱(Ach,美国Sigma公司,A1049);异丙酚(PF,阿斯利康公司)。
(三)主要仪器恒温水浴锅,张力换能器,四导生理记录仪,95%O2和5%CO2混合气,压力换能器(日本光电)。
二、实验方法
选择健康成年雄性大耳兔5只,异氟醚麻醉后,仔细分离肺动脉和胸主动脉制备血管环,连张力换能器观察LPS和在LPS下不同剂量PF(50μmol/L和100μmol/L相当于临床上1mg/kg和2mg/kg)对血管环张力的影响。
三、结果判定
离体血管环在最适张力(主动脉2.0g,肺动脉1.5g)下,平衡90min,加入终浓度为1μmol/L的苯肾,若血管环出现收缩且幅度达300mg,则认为血管环成活。
待收缩反应曲线至平台后加入终浓度为10μmol/LAch,以检测内皮细胞的完整性,若出现60%以上的舒张反应为内皮细胞完整,否则为不完整,正常组使用内皮完整血管环,不完整者弃去。
四、统计分析方法采用SPSS11.5统计学软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,组间比较采用配对t检验。P<0.05为差异有统计学意义。P<0.01为统计学差异显著。
实验结果
一、LPS孵育前后肺动脉与主动脉对PE反应张力比较正常对照组肺动脉与主动脉对PE反应张力分别为3.39±0.29和5.36±1.34,LPS孵育后张力分别为3.02±0.11和4.30±1.06(P值分别为0.044和0.005),张力改变百分比分别为10.13±10.08%和10.05±5.19%,说明LPS孵育后,肺动脉环张力有所下降,但远不如主动脉环张力下降明显。
二、PF预处理对两组肺动脉与主动脉对PE反应张力的影响用50μmol/L的PF处理后,正常肺动脉环张力由3.39±0.29降低到2.71±0.75(P=0.044)减少了20.08±15.09%,主动脉环张力由5.36±1.34下降到3.57±0.77(P=0.000)下降了9.60±3.45%,LPS孵育下的主动脉环张力由4.30±1.06增加到6.90±1.70(P=0.035)增加了43.15±20.89%。说明在正常情况下,50μmol/L的PF降低肺动脉环、主动脉环对PE的反应性。但在LPS作用下,仅增加主动脉环对PE的反应性。
用100μmol/L的PF处理后,正常的肺动脉环张力和主动脉环张力分别为3.57±0.77和3.63±1.31(P>0.05),LPS孵育下的肺动脉环张力由3.02±0.11下降为2.28±0.30(P=0.009)下降了23.18±14.63%,主动脉环张力由4.30±1.06增加到5.10±0.93(P=0.045),增加了46.50±9.53%。说明,100μmol/L的PF对正常肺动脉和主动脉张力的影响小,但可以降低LPS下肺动脉的张力,增加肺动脉的灌注,对肺循环有保护作用,并能纠正LPS引起的主动脉张力变化,维持体循环稳定。
三、PF对LPS孵育下肺动脉与主动脉环张力比值(P/A)的影响LPS作用下,P/A值增加到73.18±17.67%,50μmol/LPF仅增加主动脉张力,使P/A值降到38.65±13.85%(P>0.05),100μmol/LPF不但降低肺动脉张力,且增加主动脉张力,使P/A值降到37.13±15.48%(P<0.05)。说明,在LPS孵育下,100μmol/LPF使P/A值降低,对肺循环有保护作用,在整体上更利于血管舒缩和组织灌注。
结论:
内毒素休克时,肺动脉张力有所下降,但不如主动脉明显,与主动脉环相比张力相对增高。
在LPS孵育下,小剂量PF(50μmol/L和100μmol/L)具有增加主动脉血管张力,对主动脉张力影响小于对照组,维持体循环的作用。其中100μmol/L的PF不但增加主动脉张力,还能降低肺动脉压力,更能有效纠正血管舒缩状态,改善组织灌注,适合应用于感染性休克患者的麻醉与镇静。