生物转化法高效生产塔格糖的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zaizhen
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
D-塔格糖是一种在自然界中存在但含量极少的天然己酮糖,具有抗龋齿、改善肠道菌群、降血糖等多种生理功能,在食品、医药及化妆品行业备受青睐,是最近几年研究的热点。实验室筛选得到一株能产L-阿拉伯糖异构酶的短乳杆菌Lactobacillus brevis sp.D-tag 1(L.brevis sp.D-tag 1),L.brevis sp.D-tag 1是一株食品级优良菌株,是生产D-塔格糖的理想菌株。本文利用L.brevis sp.D-tag 1为发酵菌株,探究了其培养和产酶条件,纯化了L-阿拉伯糖异构酶L-arabinose isomerase(L-AI),表征了L-阿拉伯糖异构酶的酶学性质,实现了D-半乳糖到D-塔格糖的高效转化。本文采取单因素实验对L.brevis sp.D-tag 1菌株的发酵培养条件进行优化,确定发酵优化培养基为(g/L):L-阿拉伯糖5、玉米浆20、磷酸三钾0.2、七水合硫酸镁0.05、乙酸钠10。发酵优化条件为:初始pH 6.0-6.2,培养温度37℃,培养时间24 h。经优化后酶活提高了3倍左右。L-阿拉伯糖异构酶是一种胞内酶,对L.brevis sp.D-tag 1来源的L-AI进行提取及分离纯化。首先采用细胞破碎法获得破碎上清,即为粗酶液。然后采用硫酸铵分级沉淀(饱和度区间为(60%-80%)、透析脱盐、过DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析柱、Native-PAGE凝胶回收的方法得到纯的L-AI。采用SDS-PAGE检测L-AI纯度和分子大小,Native-PAGE检测L-AI单聚体情况。对纯化后的L-AI进行酶学性质分析,L-AI的最适反应温度为65℃,最适pH 7.0。在低于75℃,pH 6.0-9.0之间酶活力稳定。Mg2+,Co2+,Mn2+对酶反应有促进作用,其中Co2+,Mn2+促进作用较为突出,Cu2+,Ca2+对酶反应有抑制作用。L-AI的相对分子质量为60.1 kDa,以单体形式存在。酶反应动力学方程为:V=0.045[s]/(129+[s]),Km=129 mM,Vmax=0.045±0.0012 mM min-1。对细胞转化法生产D-塔格糖的工艺条件进行优化,并分别利用细胞和L-AI作为催化剂以D-半乳糖为底物生产D-塔格糖。反应完成后转化率可达到45.1%,转化率较高,细胞催化反应所需时间为48 h,细胞可重复使用3次。L-AI催化反应需要23 h,但L-AI仅可反复使用2次。
其他文献
下肢深静脉血栓(DVT)在临床上较为多见,好发于髂股静脉,由于右髂动脉横跨左髂静脉前,是本病多发左下肢的解剖学因素.发病时患侧肢体肿胀、疼痛、活动受限,严重影响患者的工作
【摘要】:尽管时代的标志是商业,但商业的精神绝不只是名誉和金钱。我们把企业看成是一个社会公民,把商业看成是一种社会责任。社会责任绝不只是债务和负担,而是企业品牌价值的实现,是选择无愧于时代的追求与目标,是时代创造的新商业文明。本文就企业树立企业的社会公民品牌的社会经济绩效进行了探索。  【关键词】:企业社会责任社会公民品牌社会经济绩效 慈善营销    我们应当充分肯定中国企业在过去三十年中的价值与
近断层地震作用下,隔震结构会受到多维地震激励。本文运用基于MSC.MARC的钢筋混凝土弹塑性分析程序TUHFIBER,采用弹簧阻尼单元模拟隔震支座,建立了结构三维有限元模型。分别
发展沼气工程对实现环境、能源和经济的可持续发展具有重要意义,而选用合理的工艺是这项工程高效开展的保证。本文对目前沼气工程发展中根据不同发酵机制研发出的厌氧消化器
研究背景随着胚胎冻融技术的进步,冻胚移植在试管助孕中所占的比例越来越高。冻胚移植可避免超促排卵过程中高雌激素环境对子宫内膜的不良影响,提高妊娠率,降低卵巢过度刺激
<正>岁末年初,又是《新理财》"给CFO的一封信"寄出的时候了。中国共产党第十九次全国代表大会(简称"党的十九大")拉开了新时代的序幕,我们将这封信的主题定为《新时代CFO畅想
期刊
博物馆是重要的文化科研机构,其中有没有管理问题,是否需要加强之,本文都给予了探讨。可见,文化的蓬勃发展是离不开科学的管理。作者认为,要办好博物馆,必须加强科学管理,并把博物馆全部管理工作分为四个系统:收集整理系统;保管保养系统;展览传播系统和财物供给与环境管理系统。最后,作者建议根据系统的划分,改革博物馆的机构设置。本文作者的“思考”仅是百家之“一鸣”,但是对文化管理的“拓荒”。
结构在强烈地震作用下,构件、节点会产生损伤,刚度、强度等力学性能会降低,结构的动力特性也会改变。分析与处理结构振动信号是结构健康监测和损伤识别的重要手段之一。利用H
利用形状记忆合金(SMA)的超弹性滞回耗能特性,根据古塔的受力和主要灾变特点设计提出一种适合古塔的新型SMA阻尼器。通过试验得出该阻尼器的双线性恢复力模型,利用MATLAB提供的
R·威尔逊编著的《成本控制手册》是一本实用性管理学著作。1975年在英美同时问世,久销不衰。1983年出增订本,精炼原有内容,增添近年来成本控制方面的最新成果,全书内容结构则保持原貌。《手册》是以各种组织的中上层管理人员为读者对象的。这些组织包括企业、事业单位和慈善福利性机构。全书分三篇十八章,约五十万字,系统、全面、简洁而通俗地介绍了成本控制的方法和技术,被誉为成本控制的“权威性指南”。书中三篇的主要内容分别为:概述成本的性质和成本控制的一般原理;阐述成本控制的重要方法和技术;说明怎样实际运用成本控制