SCF对高糖环境下膀胱Cajal样间质细胞形态及电生理功能的影响

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目的:观察干细胞因子(stem cell factor, SCF)干预后高糖环境下豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICCs)形态、超微结构及电生理的变化,探讨SCF对高糖环境下豚鼠膀胱ICCs样细胞的影响。方法:本实验应用胶原酶酶解法分离、培养豚鼠膀胱ICCs样细胞,分为正常对照组(葡萄糖浓度为5mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度为15mmol/L和30mmol/L),培养基培养72h后高糖组分为高糖对照组、SCF50ng/mL组、SCF100ng/mL组,继续培养24h及72h。采用透射电镜观察各组不同时间段ICCs样细胞超微结构的变化;采用激光扫描共聚焦显微镜测量各组不同时间段ICCs样细胞长度并记录细胞内钙离子荧光强度值的变化。结果:随着培养时间延长,通过透射电镜和激光扫描共聚焦显微镜观察显示正常对照组ICCs样细胞内超微结构、钙离子荧光值及细胞长度无明显差异。15mmol/L高糖组:高糖对照组较正常对照组ICCs样细胞内细胞器数量明显减少,线粒体肿胀、大小不等、空泡样变甚至溶解,内质网扩张,胞质广泛溶解,胞周突起变短乃至消失,细胞内钙离子荧光值显著降低、细胞长度明显缩短(P<0.01)。SCF组随着培养时间延长及SCF浓度增加,ICCs样细胞超微结构得到逐步改善,细胞器数量增多、形态趋于正常对照组,胞周突起增多。SCF50ng/mL作用24h后ICCs样细胞内钙离子荧光值及细胞长度较高糖对照组无差异(P>0.05),SCF50ng/mL作用72h后细胞内钙离子荧光值较高糖对照组增高(P<0.05),SCF 100ng/mL作用24h后较高糖对照组细胞内钙离子荧光值增高、细胞长度增长(P<0.05),SCF 100ng/mL作用72h后细胞内钙离子荧光值较高糖对照组显著增高、细胞长度明显增长(P<0.01)。30mmol/L高糖组:高糖对照组较15mmol/L高糖对照组细胞内细胞器数量进一步减少,线粒体肿胀、溶解,内质网扩张明显,胞质广‘泛溶解、大量空泡形成,胞周突起消失。与正常对照组比较,细胞内钙离子荧光值显著降低、细胞长度明显缩短(P<0.01)。SCF组ICCs样细胞超微结构较高糖对照组改变不明显,SCF50ng/mL作用24h及72h和SCF100ng/mL作用24h后ICCs样细胞内钙离子荧光值及细胞长度较高糖对照组无差异(P>0.05),SCF100ng/mL作用72h后钙离子荧光值较高糖对照组增高(P<0.05)。结论:外源性SCF干预后对高糖环境造成的ICCs样细胞形态、超微结构及电生理的异常有一定的改善或逆转作用,这为丰富糖尿病膀胱病变(diabetic cystopathy, DCP)的发病机制并为其寻找新的治疗手段提供了理论依据。
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