背景:结直肠癌是我国乃至全世界范围内发病率、死亡率一直居高不下的癌症之一,其临床特点为发病隐匿、进展快、转移率高,往往患者在确诊时肿瘤已发生转移。因此,寻找结直肠癌侵袭转移的机制对结直肠癌的诊治尤为关键。LAD1（Ladinin1）是定位于人类1号染色体的基因,其表达蛋白参与基底膜的构成。测序结果显示LAD1基因因其启动子区域的高甲基化而在结直肠癌组织中表达降低或沉默,且共定位结果显示其与E3泛素连接酶TRIM21、低密度脂蛋白受体相关蛋白LRP6互相结合。但是LAD1是否作为一个潜在的抑癌基因募集TRIM21介导LRP6泛素化降解,并最终通过抑制Wnt/β-catenin通路和结直肠癌细胞的上皮-间质转化（EMT）来影响结直肠癌的侵袭转移还未见相关报道。目的:探讨LAD1作为潜在的抑癌基因在结直肠癌侵袭转移中的生物学和分子机制,重点研究LAD1是否通过募集TRIM21介导LRP6的泛素化降解来抑制Wnt/β-catenin通路和结直肠癌细胞的EMT,并为未来与LAD1相关的结直肠癌诊疗提供科学依据和理论支持。方法:通过甲基化相关检测分析LAD1启动子区域甲基化情况;通过免疫组化检测肠癌组织和正常肠上皮组织中LAD1表达差异;通过构建稳转LAD1的肠癌细胞株进行细胞功能实验,验证LAD1对肠癌细胞增殖侵袭等的影响;通过裸鼠皮下成瘤和AOM/DSS诱导成瘤实验验证LAD1对肠癌细胞体内成瘤能力的影响;通过RT-PCR、Western blot、泛素化实验、免疫荧光技术、免疫共沉淀等实验技术研究LAD1发挥作用的分子机制。结果:LAD1在多数结直肠癌组织标本和肠癌细胞株内表达下降或沉默,同时在其启动子区域观察到明显的甲基化现象。免疫组化结果和临床病理分析表明LAD1蛋白在结直肠癌患者组织中表达较低且LAD1低表达患者的预后明显不如LAD1高表达者。细胞功能实验证明LAD1可以抑制肠癌细胞的增殖和侵袭,并促进肠癌细胞的凋亡。动物实验结果则说明LAD1过表达时肠癌细胞的小鼠体内成瘤能力得到显著抑制。分子机制方面,免疫荧光共定位和免疫共沉淀直观地验证了LAD1与TRIM21之间的相互作用;Western blot和泛素化实验等结果则表明LAD1可以募集TRIM21介导LRP6的泛素化降解并通过抑制Wnt/β-catenin通路活性和结直肠癌细胞的EMT最终影响结直肠癌的侵袭转移。结论:LAD1是一个受甲基化调控的结直肠癌抑癌基因,其过表达可以显著抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭、迁移和体内成瘤能力,并促进结直肠癌细胞的凋亡。LAD1的这些作用主要是通过募集TRIM21促进LRP6的泛素化降解来实现的,并从而抑制Wnt/β-catenin通路信号强度和肠癌细胞EMT的发生。因此,我们认为LAD1可能是一个潜在的结直肠癌诊疗新靶点,能应用于今后结直肠癌的诊断和转移治疗。