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目的：观察人发角蛋白(human hair keratin, HHK)复合神经干细胞(neural stem cells,NSCs)植入成年SD大鼠撞击性脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)模型后脊髓组织的形态学变化和大鼠行为学表现，探讨以组织工程学方法解决脊髓损伤问题的可行性，为应用神经干细胞修复神经系统疾病及损伤提供新的思路。 方法：1．神经干细胞的分离培养及鉴定。取SD大鼠胚胎(E14—16)大脑皮层组织制成单细胞悬液，在含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、白血病抑制因子、N2等的DMEM／F12无血清培养液中进行培养，用免疫荧光技术鉴定培养所得神经球后，取5～10代的细胞用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记。 2．HHK复合NSCs植入大鼠损伤脊髓的实验研究。80只成年SD雌鼠，按2×2析因实验设计随机分为：单纯损伤组，损伤后植入HHK组，损伤后植入NSCs组和损伤后复合植入HHK与NSCs组等4组。根据BBB分级标准，采用NYU撞击装置制备T10节段脊髓中度损伤模型，在损伤后即时将HHK和BrdU标记的NSCs悬液(10~5／μL，5μL)植入损伤部位。观察术后大鼠行为学改变，并进行BBB评分和斜板试验以了解其后肢运动功能恢复情况，观察神经干细胞在损伤脊髓组织中的增殖、分化、迁移情况及其与HHK在宿主脊髓内的整合情况。 结果：1．神经干细胞的分离培养及鉴定：培养细胞形成悬浮球，表现出较强的分裂增殖能力和自我更新能力，经激光共聚焦显微镜检测呈Nestin阳性，表明所获得细胞为神经干细胞。 2．脊髓损伤区组织学改变：1w：脊髓组织水肿，灰质结构消失，为液化性坏死所代替，坏死周围见白细胞浸润，胶质细胞增生，并出现嗜神经现象。HHK位于坏死区，周边细胞少。2w：水肿消退；中央坏死区出现胶质细胞，分泌胶质原纤维成海绵状结构，周边偶见单核细胞。HHK周边胶质细胞、巨噬细胞增多。HHK结构完整。4w：坏死后的空间，被胶质纤维所填充与代替。细胞成分少，脊髓胶质化改变。巨噬细胞吞噬坏死：啐片。HHK周边包绕胶原纤维，其内有成纤维细胞、胶质细胞、炎症细胞等形成的层状分布细胞群。 3．NSCs的存活、迁移和分化及其与HHK的关系：1w：NSCs集中分布于注射区。形态较小，圆形或类圆形。2w：NSCs分布较分散，数量少，脊髓损伤节段上下3mm处未见BrdU(+)细胞。4w：NSCs分布稀疏、弥散，可见于距损伤3mm处。形态