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内蒙古白绒山羊是世界名贵的珍惜物种,其绒纤维是举世公认的“纤维宝石”。通过前人研究,发现褪黑激素能够促进绒毛生长,但其信号通路及调控机理尚不清楚。因此,本研究以内蒙古绒山羊为研究对象,利用RT-PCR、荧光实时定量RT-PCR和原位杂交等技术,探讨褪黑激素受体MTNR1a、MTNR1b和RORα在内蒙古绒山羊2、4、8、10、12月份及埋植褪黑激素后皮肤毛囊中mRNA水平的表达,寻找褪黑激素促进绒毛生长的信号通路及调控机理,通过研究得到结果如下:1、克隆了MTNR1a外显子序列,该序列由1081个核苷酸组成,预测编码345个氨基酸。核苷酸和氨基酸序列与GenBank中其他哺乳动物该基因序列的同源性均较高。2、RT-PCR结果表明:MTNR1a mRNA在内蒙古绒山羊皮肤组织中不表达,而在下丘脑中表达;MTNR1b mRNA在皮肤及下丘脑组织中均不表达;RORαmRNA在皮肤组织中表达。3、原位杂交结果显示,MTNR1a mRNA在皮肤组织中不表达,而在下丘脑组织中呈广泛表达;RORαmRNA在皮肤毛囊中表达,2月份在绒干上有较强的阳性表达信号,在毛干上没有表达信号;4月份集中在毛囊的内根鞘、髓质和绒干上有表达信号;在8月份的毛干皮质部和外根鞘处有较强的表达信号;10月份在毛干和绒干上有表达信号;12月份在毛干和绒干的外根鞘部有表达信号。4、实时荧光定量RT-PCR结果表明,RORαmRNA在内蒙古绒山羊皮肤2、4、8、10、12月份均有表达;在2月份的表达量最高,4月份下降,之后8月份、10月份在逐渐升高,10月份基本达到2月份水平,12月份降到全年最低点,呈动力学变化。5、埋植褪黑激素皮肤组织RORαmRNA表达信号集中在毛干和绒干的外根鞘上;表达水平较正常组织要低。本研究在内蒙古绒山羊皮肤毛囊中检测到了RORαmRNA的表达,并且不同月份表达量存在动态变化,揭示了褪黑激素促进绒毛生长的作用途径可能是通过核受体RORα来发挥其功能的,为进一步研究褪黑激素受体与产绒性能之间的关系,阐明褪黑激素作用途径及调控机理,实现人工调控绒毛生长打下良好的基础。