鲍鱼脏器多糖的提取、分离纯化以及结构的研究

来源 :大连轻工业学院 | 被引量 : 4次 | 上传用户:godboy549321336
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本文研究了鲍鱼脏器多糖最佳提取、分离纯化方法,并确定一种鲍鱼脏器多糖的一级结构。结果表明,碱性蛋白酶为最佳提取酶,最适条件为:温度45℃,底物浓度2.5%,pH值10.0,加酶量2.0%,水解时间3h。优化辅助单因素后多糖得率为6.5%。以脱蛋白率和脱蛋白后的多糖得率为指标,采用酶法、TCA法和Sevag法脱除鲍鱼粗多糖中的蛋白,结果表明,胃蛋白酶脱除蛋白效果最好,脱蛋白率可达68.8%。脱蛋白后的鲍鱼脏器多糖经Sephadex G-100凝胶柱层析和DEAE-cellulose 52离子交换层析分离纯化得到均一多糖(AHP-2)。其分子量为10,000-15,000,是由鼠李糖、岩藻糖、木糖、半乳糖和葡萄糖组成的一种硫酸脂多糖,其摩尔比为Rha∶Fuc∶Xyl∶Gal∶Glu=6.7∶2.0∶3.9∶7.4∶1.0,硫酸根含量为11.55%。采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、红外光谱,甲基化和核磁共振方法分析AHP-2的一级结构测定。结果表明,Gal和Rha构成其主链重复核心结构,两者比例为1∶1,Rha(1→3)与Gal(1→3,6)交替连接,平均每二个单糖存在一个分支点。Rha、Xyl、Gal构成支链部分或主链边缘部分。Fuc、Glc则存在于外围边缘部分。侧链上Gal以(1→4)、(1→6)糖苷键,Xyl以(1→2)糖苷键形式存在;Fuc以(1→4)糖苷键形式存在,末端基有Glc、Gal、Fuc构成。由此推断主链骨架重复结构可能为:A,B,C由Gal(1→4)、(1→6),Xyl(1→2),Fuc(1→4)构成。其中Gal(1→4)、(1→6),Xyl(1→2)含量占大多数,为支链的主要组成部分。末端由Fuc、Glc、Gal构成。
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